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A型流感病毒是引发大规模流感疫情爆发的主要原因,其中NS1蛋白是A型流感病毒编码的一个重要的病毒因子,在被感染的细胞中发挥着重要的作用。人核仁磷酸化蛋白1（NOLC1）是一个高度磷酸化的哺乳动物蛋白。本实验室在前期,已经通过多种试验证明,H5N1亚型NS1蛋白与宿主细胞NOLC1蛋白存在相互作用,但NS1与NOLC1蛋白相互作用对流感病毒复制的影响还尚不清楚。本论文首先通过免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation,Co-IP）技术对H1N1亚型流感病毒NS1蛋白与宿主细胞NOLC1蛋白相互作用进行验证,并深入研究了NS1与NOLC1相互作用对流感病毒H1N1（PR8）复制的影响,结果如下:1.构建并筛选出NOLC1蛋白敲降稳转株（pLKO.1-TRC-NOLC1）和过表达稳转株（pBABE-puro-NOLC1）;确定鸡胚扩增出的流感病毒H1N1（PR8）的病毒滴度为1.0×108,胰酶浓度为2μg.mL-1、MOI=1.0,为流感病毒H1N1（PR8）在宿主细胞中增殖的最适条件。2.用流感病毒H1N1（PR8）分别感染pBABE-puro-NOLC1、pLKO.1-TRC-NOLC1和A549三种细胞系,不同感染时间收集样品,一方面通过TCID50技术检测病毒滴度;另一方面采用Real-time PCR技术检测病毒NP基因的三种RNA表达水平。结果表明,3株细胞系中流感病毒H1N1（PR8）的病毒滴度均在24h时达到最高,随后出现下降趋势;相比较正常细胞,NOLC1过表达稳转株中病毒的滴度增加,病毒NP RNA水平升高,而NOLC1敲降稳转株中病毒的滴度降低,病毒NP RNA水平降低。从上述试验结果中得出病毒的复制水平与宿主内NOLC1的表达量存在正相关关系。3.为了探索NS1与NOLC1相互作用对流感病毒H1N1（PR8）复制的影响,对宿主感染H1N1（PR8）后不同时间内NOLC1mRNA表达水平进行检测,发现病毒感染宿主细胞后的48h内,NOLC1mRNA的表达量整体呈现下降的趋势,结合上述实验结果我们可以得知,在病毒感染过程中,宿主通过NOLC1蛋白与流感病毒的NS1蛋白相互作用,降低了病毒的复制水平,进而影响流感病毒的感染进程。综上,本研究揭示了NOLC1与NS1相互作用对流感病毒感染过程的影响,为开发治疗IAV引起的疾病药物的设计提供新思路。