【摘 要】
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本研究旨在利用糖皮质激素与细胞核上糖皮质激素受体特异性结合的能力,合成一种具有特异性细胞核靶向能力,高效、低毒的基因治疗载体。利用Traut’s试剂将糖皮质激素曲安奈德与小分子量聚乙烯亚胺（PEI 1800）合成,得到了曲安奈德取代PEI（TA-PEI）。该聚合物同时具备糖皮质激素的细胞核靶向能力与PEI的DNA压缩能力。通过琼脂糖凝胶电泳实验发现,TA-PEI在与DNA的比例为0.5∶1（w/w
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本研究旨在利用糖皮质激素与细胞核上糖皮质激素受体特异性结合的能力,合成一种具有特异性细胞核靶向能力,高效、低毒的基因治疗载体。利用Traut’s试剂将糖皮质激素曲安奈德与小分子量聚乙烯亚胺（PEI 1800）合成,得到了曲安奈德取代PEI（TA-PEI）。该聚合物同时具备糖皮质激素的细胞核靶向能力与PEI的DNA压缩能力。通过琼脂糖凝胶电泳实验发现,TA-PEI在与DNA的比例为0.5∶1（w/w）的条件下可以将DNA完全复合。粒径测定实验显示,随着TA-PEI与DNA质量比进一步增大,TA-PEI/DNA复合物形成平均粒径为100nm左右的复合物粒子。同时复合物的Zeta电位也在TA-PEI/与DNA的质量比超过3以后稳定在30mV-40mV左右。在HEK293和HepG2两种细胞系上将该聚合物载体用于两个常用的报告基因-绿色荧光蛋白基因及虫荧光素酶基因的转染时,我们获得了接近于大分子PEI（PEI 25kDa）的基因转染活性,同时其细胞毒性小于PEI 25kDa。采用激光共聚焦显微镜对载体在细胞内进行定位,发现TA-PEI能够有效地进入细胞,聚集在细胞核周围,并部分进入细胞核内部,实现了细胞核靶向的目的。总之,细胞核靶向PEI衍生物显示了理想的基因转染效果,是一种有应用潜力的基因治疗载体。
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