鸭病毒性肝炎是危害我国养鸭业最严重的疾病之一,该病主要感染1月龄以下的雏鸭。预防和控制该病的主要手段是进行免疫接种。为了更方便快速地检测种鸭的免疫水平,本研究建立了检测Ⅰ型鸭病毒性肝炎卵黄抗体的乳胶凝集试验方法和间接ELISA方法。主要完成了以下研究工作:第一,采用本实验室提纯DHV-Ⅰ的方法——差速超高速离心法,得到了试验所用的抗原,病毒蛋白含量为8122μg/mL。第二,用本实验室已克隆表达的DHV-I VP1重组蛋白作为抗原致敏聚苯乙烯乳胶,建立了检测DHV-I抗体的乳胶凝集试验方法,确定VP1蛋白的最佳致敏量为200μg/mL,致敏温度37℃,致敏时间2.5h。研究结果表明,致敏乳胶无自凝性,灵敏度达到74.3%,与鸭瘟、鸭疫里氏杆菌、鸭链球菌等无交叉反应。第三,通过试验,确定了可快速简便提取卵黄抗体的条件,即将卵黄做1:8-1:10倍稀释,充分搅拌后4℃8000 r/min离心60 min即可用致敏乳胶来检测。该条件简便易行,可在设备简陋的基层应用。第四,用提纯的DHV-I作为包被抗原,建立了检测DHV-I卵黄抗体的间接ELISA方法。本方法最佳工作条件为:抗原包被浓度为1:400(5.38μg/mL),样品稀释浓度为1:256(9.68μg/mL),酶标二抗稀释浓度为1:3200,阴阳性临界OD值为0.203。第五,应用乳胶凝集试验方法和间接ELISA方法,对850份血清和630份卵黄样本进行检测,结果表明:与ELISA相比,LAT的敏感性为74.3%,特异性为96.1%,总符合率为85.5%。