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植物内生真菌(endophytic fungi)是在健康植物的整个生长周期或者部分生长周期存活于植物组织内,并与宿主植物“和睦共处”,而不导致宿主植物出现明显病害的真菌。它能产生多种代谢产物,并可以产生与宿主植物的生物活性物质相同或者近似的物质,可以作为植物天然活性产物的替代或者有效物质的可持续来源。植物内生真菌能产生具有广泛生物活性的代谢产物,可研究作为抗生素、抗病毒、抗癌药、抗氧化剂、降血糖药、溶血栓药、杀虫剂、心脑血管疾病药物及免疫抑制剂等药物的先导化合物。阿尔茨海默病(AD)是中枢神经系统的神经退行性疾病。随着人口老龄化,AD患者急剧增加,但临床上治疗AD药物选择有限,并且效果较差。乙酰胆碱酯酶(AChE)是中枢和外周胆碱能神经传递的关键酶。阿尔兹海默病(AD)患者的认知缺陷和记忆丧失等症状通常是由于胆碱能神经元和突触的丧失从而导致大脑皮质和某些皮质下区域的胆碱能神经传递受损。通过AChE抑制剂抑制胆碱酯酶,能增加脑中乙酰胆碱(ACh)水平,增强AD患者脑中的胆碱能传递并缓解胆碱能缺陷的症状。抑制胆碱酯酶(主要是AChE)是现今治疗中枢神经系统ACh严重丧失的痴呆症的主要策略。单胺氧化酶(MAO)是一种含有黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)的线粒体酶,能催化神经递质和生物胺氧化脱氨,分为MAO-A和MAO-B。MAO-A抑制剂临床上主要医治抑郁症,而MAO-B抑制剂主要医治帕金森病(PD)。由于单胺氧化酶在精神神经系统方面的重要作用,它一直都是国内外学者、新药开发人员的研究热点,但却仍然缺少对单一MAO具有高效和选择性的抑制剂,亟需开发新的、选择性高的、副作用小的MAO抑制剂。本研究采集了50份植物标本,分离纯化出216株植物内生真菌(13个属),利用乙酸乙酯和正丁醇分别萃取代谢产物,分别检测AChE抑制活性,从中筛选出两株代谢产物AChE抑制活性较高的菌株(抑制率分别为79.2%和70.0%),经形态学结合分子生物学鉴定这两株菌分别为链格孢霉(Alternaria alternata)和土曲霉(Aspergillus terreus)。大规模发酵活性菌株,乙酸乙酯萃取后,先用200mL体积硅胶柱层析摸清代谢产物活性组分的洗脱极性区间,然后用3400mL体积硅胶柱层析重点洗脱,经重结晶纯化后得到组分C-B-17,经UV-Vis、HPLC及LC-MS分析后,检测出其最大吸收波长为320nm,含量为89.2%,分子量为464.2。利用模式生物秀丽隐杆线虫的阿尔兹海默病Aβ模型CL4176品系验证样品C-B-17-1的活性,证明样品C-B-17-1能有效延长CL4176线虫的瘫痪时间,因此样品C-B-17-1具有进一步研究作为新的AD治疗药物的潜力。另外分离纯化了实验室保存的两株菌的代谢产物,利用酶标法检测各组分抑制MAO的活性,共分离出20个组分具有MAO抑制率。本研究拟筛选代谢产物具有AChE抑制活性和MAO抑制活性的植物内生真菌,可作为治疗精神神经系统方面疾病(AD、帕金森病、抑郁症等)的新药和先导化合物,解决现在疾病治疗的困境。