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背景鉴别在犯罪现场发现的斑痕等人体检材的组织来源,对判断案件类型和证明犯罪事实有重要的作用。当代法庭科学对微量、陈旧生物证据的应用,使组织鉴别变得更为必要,同时在技术是也提出了更高的要求。探索新型的分子组织标记,研究开发与当代DNA分析技术相匹配的组织鉴别技术,是目前法医物证学的研究热点之一。目的本研究调查人体主要组织胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)基因和DEAD盒多肽4(DEAD (Asp-Glu-Ala-Asp) box polypeptide 4,DDX4)基因的启动子甲基化水平,评估GFAP启动子低甲基化作为脑组织、DDX4启动子低甲基化作为精液斑组织标记的可行性,初步探讨DNA甲基化作为法医组织标记的意义。方法应用联合亚硫酸氢盐的限制酶法(Combined Bisulfite Restriction Analysis,COBRA),一种半定量的DNA甲基化检测技术,调查6例尸体主要组织(大脑、心脏、肺、肝、胰、脾、肾、皮肤)和17例精液的GFAP和DDX4启动子甲基化水平,对数据进行单因素方差分析并确定判别值。结果人类大脑组织GFAP启动子甲基化水平均低于45.82%((X| ̄)brain=44.70%,Sbrain=8.38%),非脑组织均高于58.60%((X| ̄)non-brain=68.01%, Snon-brain=1.42%),以52.87%为判别值,可以有效的区别脑组织与非脑组织。人精液DDX4启动子甲基化水平均低于50.41 % ((X| ̄)sperm=11.52%EcoRI, 11.88%TaqI ; Ssperm=8.98%EcoRI, 10.25%TaqI) ,体细胞组织均高于75.41%((X| ̄)somatic=82.73%EcoRI, 82.94%TaqI;Ssomatic=3.54%EcoRI, 3.91%TaqI),以49.85%(EcoRI位点)或50.58%(TaqI位点)为判别值,可以有效的区别精液斑组织与非精液斑组织。结论大脑组织的GFAP启动子甲基化水平显著低与非脑组织,精液DDX4启动子甲基化水平显著低与非精液的体细胞组织,GFAP启动子低甲基化可作为脑组织特异标记,DDX4启动子低甲基化可作为精液特异标记。考虑到法医学检材的特殊性和DNA标记的优势,组织特异性甲基化变异位点(methylation-variable positions,MVPs)可能是一种理想的分子组织标记。筛选一组合适的组织特异性MVPs位点,开发通用的基于DNA甲基化的组织ID系统,可能是解决目前法医组织鉴定问题的有效途径。