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红车轴草(Trifolium Pratense L.)为豆科(Leguminosae)蝶形花亚科车轴草属(Trifolium),一年生或多年生草本植物,又名红三叶草、千日红、羊马草、紫苜蓿等。复叶互生,小叶3枚,齿裂,花小,芳香,聚生成头状或穗状花序,荚果小,含1-2粒种子,根系发达。喜温凉湿润气候,主要产於温带和亚热带地区,世界各地均有栽培。不仅有保持和改良土壤的作用,而且内服用于解痉、祛痰、止咳止喘,外敷治脓肿、烧伤和眼疾等。本属植物全世界约360种以上,中国常见野生种与引入种有8种,其中栽培较普遍的种有红三叶、白三叶与绛三叶等。车轴草属药用成分的研究,国内外已有许多报道。花序及带花枝叶可入药。近几年,科学家发现红车轴草是少数几种含4种异黄酮(植物雌激素)的植物之一,对于预防乳腺癌、前列腺癌、结肠癌、改善骨质疏松和改善妇女更年期症状等有一定的作用,因而受到关注。并已经成为欧美市场上极受欢迎的保健食品。本文利用系统溶剂提取法、正相和反相硅胶柱色谱法、高效液相色谱法等现代分离技术,从恩施红车轴草的乙醇提取物乙酸乙酯部位中分离了25个化合物,运用现代波谱学技术鉴定了15个化合物,确定结构的化合物依次为:双苯吡酮类化合物01;五环三萜类化合物02;豆甾酮类化合物03、04、05;黄酮苷类化合物06、07、08、09、10、11;二氢黄酮苷类化合物12;色原酮苷类化合物13;苯并四氢呋喃木脂素类化合物14以及1, 8-二羟基型蒽醌类化合物15。其中2个可能的新化合物,分别为13、14,其精确结构仍需要二维核磁谱和质谱进行进一步的确定。9个化合物01、02、03、04、05、10、11、12、15为首次从该植物中分离得到。新化合物分别命名为:3-Methylchromone-7-α-O-glucoside-2’-O-rhamoside (13)和Trihydrodehydrodiconiferyl alcohol 9’-O-glucoside (14)。已知化合物分别鉴定为:1-羟基-5, 6, 7-三甲氧基双苯吡酮(1-hydroxy-5, 6, 7-thrimethoxy-xanthone) (01),齐墩果-12-烯酯(Methyl-3-oxoolean-12-en-28-oate) (02) ,豆甾-4-烯-3-酮(Stigmast-4-en-3-one) (03),豆甾-4-烯-3, 6-二酮(Stigmast-4-en-3, 6-dione) (04),α-豆甾-4-烯-3, 6-二酮(α-stigmast-4-en-3, 6-dione) (05),槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(Quercertin-3-O-α-L-rhamoside) (06),金丝桃苷(Hyperin) (07),槲皮素-3-O-α-D-葡萄糖苷(Quercertin-3-O-α-D-glucoside) (08), Isorhamnetin 3-O-β-D-glucopyranoside (09),Aurilatin (10),Quercertin 3-O-α-L- arabinpyranoside (11),7-glupyrancosyl-3, 5-dihydroxyflavanone (12)和大黄素甲醚(physcion) (15)。