储烟霉菌生物学特性及霉变控制措施研究

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通过对储藏片烟霉菌的分离、鉴定、生理测定、药剂实验以及在实仓条件下对储藏片烟温湿度的监测、药剂防霉试验、药剂残留量的测定,探讨了储烟霉变病理生物学机制及治理措施。本研究获得如下主要结果。1 储藏片烟主要霉菌的种类鉴定 现已鉴定出引起储烟霉变的霉菌分别是曲霉(Aspergillus)、青霉(Penicillium)、毛霉(Mucor)和根霉(Rhizopus)等。青霉和曲霉是引起储烟霉变的主要霉菌,其中曲霉菌中的黄柄曲霉[A. flavipes (Bain.& Sart.) Thom &Church]、黑曲霉(A. niger v. Tiegh.)和聚多曲霉[A. sydowii (Bain. &Sart.) Tomb&Church],青霉菌中扩展青霉(P. expansum Lind),毛霉菌中的总状毛霉(M. racemosus Fres.),根霉菌中的葡枝根霉[R.. stolonifer(Ehrenb.ex Fr.)Lind]是霉菌中主要的种。2 储藏片烟霉菌的生物学特性 测定了储藏片烟霉菌的营养生长、分生孢子萌发和芽管伸长的温湿度范围,并在液体培养基中测定了温度对菌丝生长的影响。结果表明:菌丝体营养生长的温度范围:曲霉菌、青霉菌和毛霉菌为 10℃~35℃,最适生长温度都为 25℃,0℃低温对菌丝和分生孢子均无致死作用,但抑制菌丝生长和分生孢子萌发,菌丝的致死温度为 40℃,分生孢子在 40℃培养 7d 后仍具有萌发力。而根霉菌为 10℃~40℃,最适温度为 35℃,致死温度为 45℃。20℃~30℃范围有利于分生孢子萌发和芽管伸长,分生孢子萌发以 25℃最佳,芽管伸长以 30℃最佳,但根霉在 25℃~40℃范围有利于分生孢子萌发和芽管伸长,分生孢子萌发以 35℃最佳。液体培养,曲霉菌和青霉菌温度为 25℃时菌丝生长量最大,毛霉菌和根霉菌温度分别为 10℃和 35℃时菌丝生长量最大。曲霉菌在 RH 为 70%~75%时菌丝生长速率最大,而青霉菌和毛霉菌 RH 为 90%,根霉菌为 85%。分生孢子的萌发对湿度要求严格,在 RH>60%时霉菌孢子才能萌发,且在自由水和有水膜的情况下,萌发的更好。3 五种抑霉剂对储藏片烟霉变的抑制效果 丙酸、乳酸、苯甲酸、对羟基苯甲酸和富马酸二甲酯 5 种药剂对霉菌进行处理,5 种药剂对霉菌都有一定的抑制作用,但是,它们的有效作用浓度和作用方式在对所分离的 6 种霉菌有所不同。丙酸、乳酸、苯甲酸和对羟基苯甲酸抑制总状毛霉菌丝生长的 EC50分别为 1.4133、1.3139、0.6156μg/mL 和 1.3642μg/mL,富马酸二甲酯的抑制率达到 100%,抑制芽管伸长的 EC50分别为 3.1538、2.3688、1.9130、2.5592 μg/mL 和 0.0300 μg/mL;抑制黑曲霉菌丝生长的 EC50 分别为II1.8340、3.76281、.4998 μg/mL 和 1.1140 μg/mL,富马酸二甲酯的抑制率达到 100%,抑制芽管伸长的 EC50分别为 3.8194、4.0340、4.4710、3.8107 μg/mL 和 0.1192μg/mL;抑制葡枝根霉菌丝生长的EC50分别为2.06420、.03691、.22201、.6853 μg/mL和 1.4375 μg/mL,抑制芽管伸长的 EC50分别为 1.9209、1.9895、3.1923、2.6737μg/mL 和 1.2378 μg/mL;抑制黄柄曲霉菌丝生长的 EC50分别为 1.0039、1.2967、1.2756、1.2691 μg/mL 和 0.9552 μg/mL,抑制芽管伸长的 EC50 分别为 2.2882、3.4324、2.9719、2.932 μg/mL 8 和 0.5833 μg/mL;抑制扩展青霉菌丝生长的 EC50分别为 2.3451、5.6874、1.5337、1.2992 μg/mL 和 1.2985 μg/mL,抑制芽管伸长的 EC50分别为 2.3737、7.4281、2.7819、1.1462 μg/mL 和 1.4570 μg/mL;抑制聚多曲霉菌丝生长的 EC50分别为 1.8771、1.9190、1.3065、1.0543 μg/mL 和 1.1825μg/mL,抑制芽管伸长的 EC50 分别为 2.5474、1.8751、4.0291、3.9319 μg/mL和 1.3744 μg/mL。以上药剂对孢子萌发和牙管伸长的抑制率差异显著,其中富马酸二甲酯能较强的抑制孢子萌发和芽管伸长。药剂对孢子萌发和芽管伸长的抑制率随着药剂的浓度的上升而下降。以上 5 种药剂对霉菌的菌丝生长、孢子萌发和芽管伸长的抑制试验中富马酸二甲酯抑制作用最强,防效最好;丙酸、乳酸、苯甲酸和对羟基苯甲酸防效较差 。4 温湿度变化对储烟霉病的影响选用对温湿度敏感性较强的自钻式液晶温湿度检测仪对箱装片烟内部的温湿度进行监测。本次试验中储烟的温度基本控制在 10~20℃之间,低于霉菌最适生长温度;储烟含水率控制在储烟储藏安全水分范围 11~14%之间。储烟温湿度控制在此范围内,没有霉变的发生。5 富马酸二甲酯(DMF)防霉效果五种不同浓度的富马酸二甲酯(DMF)分别直接添加到三种不同含水率储烟中,在室温下对其防治效果进行试验,含水率为 35%的烟叶,对照 9d 开始霉变,DMF 添加量为 500mg/kg 的烟叶 19d 霉变,2000mg/kg 的烟叶直至 45d 才霉变;含水率为 18%的烟叶,对照在 53d 开始霉变,DMF 添加量为 500mg/kg 的烟叶 123d霉变,DMF 添加量为 1000、1500mg/kg 和 2000mg/kg 的烟叶至 289d 仍未霉变。此结果表明,烟叶含水率相同,药剂添加量不同时,药剂添加量越大,防效越好 。DMF 添加量为 500mg/kg 的烟叶,含水率为 35%时,19d 开始霉变,含水率为18%时,123d 开始霉变,含水率为 13%的烟叶直至 289d 仍未霉变,以上结果表明,烟叶在药剂添加量相同的情况下,含水率越高,霉变发生所需时间越短。6 富马酸二甲酯(DMF)残留量检测本
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