埃博拉病毒病(Ebola virus disease,EVD),是由埃博拉病毒(Ebolavirus,EBOV)引起的急性出血性传染病。埃博拉病毒在1976年非洲流行性出血热暴发时期被发现,是目前所知最为致命的人类病毒之一。2014年在西非暴发了有史以来情况最严重持续时间最长的埃博拉疫情,全球共计28652例疑似及确认病例,死亡率接近40%。埃博拉病毒病发展迅速,病患有很强的传染性,这给临床医治带来了极大的困难。从预防的手段提前介入,阻止病毒入侵是更为合理的选择。因此,非常有必要研制出成本低廉、安全有效的疫苗,用于预防控制埃博拉病毒的感染。随着分子生物学技术的快速发展,新型疫苗及相关生产技术逐渐代替传统的疫苗模式,成为现在研究的主要方向。包括重组亚单位疫苗、基因疫苗、重组活载体疫苗和多肽疫苗在内的多种新型疫苗,正一步步走出实验室,应用于疾病预防控制当中。本课题将参照人密码子使用频度优化埃博拉病毒膜蛋白GP的胞外区,并于末端加入人IgG Fc片段序列,形成稳定的可溶性重组蛋白GP-Fc。应用HEK293F真核细胞表达系统制备重组蛋白GP-Fc,形成埃博拉重组亚单位疫苗。并将重组蛋白序列插入人用基因疫苗载体pVR,合成并扩增质粒,形成埃博拉重组蛋白基因疫苗。此外,应用慢病毒骨架的假病毒方案,制备并建立埃基于假病毒的埃博拉病毒中和抗体检测系统。两种疫苗免疫小鼠后,通过间接ELISA和间接免疫荧光,对两种疫苗诱导的体液免疫进行测定,评价他们的免疫原性。利用建立起的埃博拉中和抗体检测平台,再对两者诱导免疫反应的保护性进行评价。实验结果证明,我们成功制备了埃博拉假病毒,并将其应用于活性检测。经免疫学实验证明,重组蛋白GP-Fc及基因疫苗pVR-modGP-Fc都具有较好的免疫原性,两种免疫后第8周的血清抗体结合效价均超过1:100K,其中重组蛋白可以诱导产生更强的体液免疫。基于埃博拉假病毒系统的中和试验结果证明,两种疫苗均可诱导保护性抗体的产生,而基因疫苗诱导的保护性更佳。通过本研究,我们获得了两种具备较好免疫原性的埃博拉病毒疫苗方案,并成功建立埃博拉假病毒检测系统。该工作为发展新型埃博拉疫苗以及筛选中和单克隆抗体打下基础。