基于CASPASE信号通路探讨莪黄汤对大肠癌凋亡的影响

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目的:基于CASPASE信号通路探讨莪黄汤对大肠癌凋亡的影响。  方法:按照随机数学模型原则,将50只健康SD大鼠分成随机5组并逐个编号,雌雄各半,体重控制在(280±10)g。在实验中心适应性生长1周,通过预实验中控制的药物分组量分别灌胃给药:莪黄汤每毫升药液中含生药2 g,莪黄汤组由高,中,低(7.14g/kg,3.57g/kg,1.79g/kg)剂量组(灌胃剂量1ml)组成,空白组为生理盐水组(灌胃剂量1ml,pH7.2),阳性对照组由腹腔注射氟尿嘧啶腹腔0.025g/kg/d,调整注射剂量1ml构成。标准化灌胃1周,无菌条件下提取各组含药血清。在体外使用含药血清体培养SW480细胞,通过MTT法,流式细胞法观察其凋亡情况。应用免疫组化法,Western Blot法检测凋亡过程中caspase-3,8的变化。通过CRISPR/Cas9方法沉默caspase-3获得目标细胞株,再通过观察caspase-3,8表达的变化,观察莪黄汤作用的位置。  结果:莪黄汤能够使得caspase-3,8的表达增加。  结论:1.中药复方“莪黄汤”不具有细胞毒性。2.中药复方“莪黄汤”作用于细胞凋亡的作用效果存在浓度依赖性。3.中药复方“莪黄汤”发挥抑制作用可能发生在S期。4.中药复方“莪黄汤”抑制肿瘤的作用效果弱于氟尿嘧啶。5.中药复方“莪黄汤”能够使得细胞内caspase-8的含量增加。6.中药复方“莪黄汤”可能通过caspase外源性通路作用于细胞凋亡。
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