绿原酸对猕猴桃和樱桃番茄采后病原菌抑制作用及机理研究

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软腐病和酸腐病分别是猕猴桃和樱桃番茄常见的采后真菌病害,本研究从自然发病的红阳猕猴桃和樱桃番茄上分离出病原菌并进行回接验证,通过形态学鉴定和分子生物学手段,最终确定从红阳猕猴桃和樱桃番茄分离出的病原菌分别是拟茎点霉Diaporthe phaseolorum和白地霉Geotrichum candidum。课题组已有病原菌株灰霉Botrytis cinerea同样是常见的樱桃番茄酸腐病病原真菌。因此找到合适的抑菌剂加强对这三种病原菌的抑制,对于减少猕猴桃和番茄的采后病害、促进相关产业的健康发展十分重要。绿原酸是一种从天然植物中提取出的广谱抗真菌抑菌剂,在果蔬保鲜、食品防腐、医药治疗等领域有广泛的应用,具有重要的研究价值和应用前景。在体外试验中,发现绿原酸能够抑制病原菌在培养基上的生长情况、降低其孢子萌发率和萌发后芽管长度,且上述抑制作用与剂量明显相关。此外绿原酸还可以促进病原菌产孢,说明病原菌遭遇逆境胁迫。此外还初步探究了抑制作用机理,研究发现绿原酸能显著抑制病原菌菌丝的活力,促进线粒体超氧化物的积累、提高细胞内Ca2+浓度,降低线粒体膜电位、降低其ATP含量,并能促进其细胞的凋亡和死亡,从而实现对其生长的抑制;此外研究发现绿原酸处理后菌丝中活性氧的积累显著升高,菌丝过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的酶活也随着绿原酸浓度的升高逐渐升高,丙二醛(MDA)含量则逐渐降低。实验表明添加抗氧化剂NAC可以一定程度上恢复菌丝体的生长,这也说明活性氧的积累是抑制病原菌生长的原因之一。实验结果初步表明绿原酸是通过促进菌丝体活性氧的积累、抑制病原菌线粒体活力、促进病原菌凋亡和死亡从而实现抑制病原菌的生长和致病力的目标。本研究表明绿原酸可以显著降低病原真菌侵染后猕猴桃和樱桃番茄的发病率及病斑直径,并且绿原酸可以提高数种水果表皮抗氧化酶和L-苯丙氨酸解氨酶的酶活,有效提高两种水果的免疫能力、降低病原菌对其致病力;同时绿原酸处理后的猕猴桃和樱桃番茄的可溶性固形物、可滴定酸和硬度等生理指标没有明显改变,不影响水果品质和市场销售,具有良好的市场应用价值。
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