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目的:绒癌是一种高度恶性肿瘤,早期即可发生血行转移,导致全身播散。虽然目前化疗疗效较好,但部分病人可产生耐药,一旦发生耐药,病人预后极差。因而耐药绒癌的治疗是临床医疗的难点。小RNA是一组非编码RNA分子,通过与特定靶mRNA结合,负性调控靶mRNA的转录和翻译。由此推测,通过补充MiRNA或使用抑制物调节靶mRNA及其蛋白的表达,可达到控制肿瘤恶性增殖和促进细胞凋亡的目的。小RNA的发现为耐药绒癌的基因治疗提供了更好的选择。Survivin是凋亡抑制蛋白（IAP）家族成员,具有强烈的凋亡抑制功能和促细胞增殖活性。Survivin在成熟终末分化组织中基本不表达,而在肿瘤组织中却特异性高表达,使其成为肿瘤发病机制及靶向治疗的研究热点。已有应用反义核苷酸等方法抑制肿瘤细胞Survivin基因表达,促进肿瘤细胞凋亡的研究。但应用小RNA来抑制Survivin表达尚不多见。本研究旨在通过探讨Survivin靶向小RNA转染人绒癌细胞,对Survivin表达的影响,及其对绒癌细胞增殖、凋亡的影响,为小RNA在耐药绒癌基因治疗中的应用提供实验依据。方法:培养人绒癌细胞株JEG-3细胞;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测细胞的Survivin基因表达水平;Western blot法检测细胞的Survivin蛋白表达水平;设计合成针对Survivin基因的short haipin RNA （shRNA）序列;脂质体法转染人绒癌细胞株JEG-3 ,空载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP和未转染组细胞为对照组;MTS法测定各组细胞的增殖情况;RT-PCR检测各组细胞Survivin基因表达水平;Western blot法检测各组细胞Survivin蛋白的表达;流式细胞术检测各组细胞周期。用SPSS 13.0统计软件对所有数据进行统计学分析。数据以均数±标准差（x±s）表示,两组间均数比较用t检验,多组间均数比较采用单因素方差分析,p>0.05为无显著性差异,p<0.05为具有显著性差异。所有实验结果均重复3次。结果:1 JEG-3细胞有较强的Survivin基因表达。2 JEG-3细胞有较强Survivin蛋白表达。3转染Survivin shRNA 24、48、72h后的细胞生长明显受到抑制,转染24、48h后对细胞的抑制率最高分别达到48%和56% ,而转染pcDNATM6.2-GW/EmGFP和单纯添加转染试剂对细胞的生长影响不大。4与未转染组和空转组相比,转染组细胞中Survivin mRNA的表达明显减弱,有显著差异（P<0.05）。5转染组Survivin蛋白条带印记明显低于未转染组和空转组,GENE TOOL软件灰度分析显示,转染24h组与48h组,相对未转染组,蛋白质表达抑制率分别为22.45%和33.34%,对比组之间差异有显著性（P<0.01）,空转组与未转染组相比差异无显著性（P>0.05）。6 Survivin基因表达下降的实验组细胞出现G0/G1阻滞,G0/G1期细胞数由32%增加至45%,细胞数增加了22.45%,同时S期细胞比例从43%下降至23%。结论:人绒癌细胞株JEG-3中有较强的Survivin基因表达。Survivin靶向的shRNA能抑制JEG-3细胞中Survivin的表达,转染Survivin小RNA能使JEG-3细胞由G0/G1期进入S期受到阻滞,细胞增殖速度下降,从而有效抑制JEG-3细胞生长,促进细胞凋亡。