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酒精性肝病（Alcoholic liver disease,ALD）是由于长期、大量饮酒引起的肝脏的损害，其发展过程为酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝硬化。在西方国家ALD的发病率呈上升趋势，目前我国酒精性肝病的发病率也逐渐增加，已成为仅次于病毒性肝炎的第二大病因。ALD已是当今世界共同的一个重要公共问题。因此，酒精性肝损伤受到日益广泛的关注。 酒精主要在胃和小肠上段吸收，绝大部分在肝脏代谢，短时间大量饮酒导致其在体内不能及时被代谢，可能导致急性酒精性肝损伤。目前已有的研究表明，ALD的主要发病机制包括乙醛毒性、内毒素损伤、氧化应激损伤和炎症反应损伤及营养不良；其中炎症反应在ALD的发生发展过程中起到了关键性的作用。在酒精的刺激下，肝脏内被激活的的巨噬细胞可产生大量的包括肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）等在内的炎症因子，很可能参与了ALD的发病过程。由于ALD的发病机制复杂，目前也没有有效的治疗方法，故关于ALD的具体发病机制和防治办法已成为肝病领域急需解决的问题之一。 嘌呤受体P2X7是一种离子型配体门控通道受体，由配体ATP激活后，可使离子通道开放，促进Ca2+、Na+内流以及K+外流，进而介导一系列细胞信号转导，如可激活核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（NLRP3、NLR炎性体家族中的重要一员)，核转录因子κB（NF-κB）、转化生长因子-β（TGF-β）等多条通路，诱导成熟白细胞介素IL-1β、IL-18、TNF-α等细胞因子的成熟和释放，在炎症反应和免疫调节中起着非常重要作用。 研究表明，ATP-P2X7R是激活NLRP3的一条重要信号通路，NLRP3炎性小体属于NOD样受体（nucleotide binding oligomerization domain-likereceptors,NLRs），NLRs分为NLRA、NLRB、NLRC和NLRP四个亚型。其中NLRP3炎性体主要由NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白激酶-1（caspase-1）组成，在多种与炎性相关的肝病发生发展过程中都起到重要的调节作用。目前研究表明激活P2X7受体是诱发NLRP3炎性体的关键因素，NLRP3的活化主要通过分泌IL-1β、IL-18发挥下游效应。还有报道肝损伤组织中P2X7受体表达上调，由此推测，P2X7R可能与肝损伤有密切的关系，P2X7R-NLRP3信号通路可能也参与其中，本实验应用急性酒精肝模型，探讨P2X7R-NLRP3信号通路在酒精性肝损伤中的作用。主要内容概况如下： 1.酒精致肝脏损伤模型的建立 采用NIAAA法建立小鼠急性酒精性肝损伤模型，将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为3组（n=10）：对照组、模型组、P2X7特异性阻断剂A438079干预组，最后一周，分组进行以下处理，对照组和模型组：给予等剂量的生理盐水腹腔注射（约0.2ml/只），每日一次；A438079组：根据小鼠体重，按200μmol/kg的A438079（按7mg/ml配制A438079，约0.2ml/只）腹腔注射，每日一次。最后一天清晨给予单次31.5%酒精溶液灌胃，剂量为0.2ml/20g。禁食9 h后，每组随机抽取6只小鼠眼眶取血并剖腹取肝，血清用于检测谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、胆固醇（TCHO）、甘油三酯（TG）的水平，肝组织用于组织病理的观察和免疫组化分析。 2.P2X7受体在酒精性肝损伤中模型中的表达 我们选用免疫组化方法检测肝组织中P2X7的表达水平。结果显示，在正常肝组织中P2X7表达很低；与正常对照组比较，模型组小鼠肝脏组织P2X7蛋白表达明显升高；与模型组相比，A438079组小鼠肝脏组织P2X7蛋白表达明显降低。结果表明，P2X7在酒精性肝损伤模型组表达明显增高，在A438079组表达明显降低。 3.在酒精性肝损伤模型中嘌呤受体P2X7介导的NLRP3信号通路的作用 Western blot法检测肝组织中的P2X7、NLRP3、ASC、TNF-α、IL-1β、IL-18表达水平。结果显示，与对照组相比，模型组P2X7、NLRP3、ASC、TNF-α、IL-1β、IL-18的表达明显升高；与模型组相比，A438079组P2X7、NLRP3、ASC、TNF-α、IL-1β、IL-18的表达水平明显降低。提示：P2X7可能是通过激活NLRP3炎性体，NLRP3炎性体通过影响TNF-α、IL-1β、IL-18的分泌发挥下游效应。 4.结论 综上所述，在酒精性肝损伤模型中，模型组P2X7、NLRP3的表达明显增强，应用P2X7受体特异性抑制剂A438079，NLRP3、TNF-α、IL-1β、IL-18的表达明显降低，可有效抑制酒精性肝损伤中炎症反应，由此推测酒精诱导的肝损伤可能与P2X7R-NLRP3信号通路有关。