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目的:研究猪苓多糖对巨噬细胞M1/M2极化亚型的调节作用。方法:1、巨噬细胞株RAW264.7体外培养,用100ng/ml IFN-Y诱导巨噬细胞株RAW264.7极化为M1亚型巨噬细胞,流式细胞术检测相关特异性膜表面分子CD16/32、CD40和CD86的阳性表达率,实时荧光定量PCR (RT-PCR)检测TNF-α、IL-1β、IL-6、ARG1和iNOS mRNA的相对表达量,验证M1模型的极化成功。2、猪苓多糖干预极化成功的M1亚型巨噬细胞24h,流式细胞术检测多糖对巨噬细胞膜表面分子阳性率的影响,RT-PCR方法考察猪苓多糖对M1亚型巨噬细胞的相关mRNA作用6h的影响,ELISA方法检测炎症因子的分泌的情况,Grass法检测一氧化氮释放量。3、用终浓度为20ng/ml的IL-4诱导巨噬细胞极化为M2亚型巨噬细胞,以CD206和CD23验证M2亚型巨噬细胞模型的成功。猪苓多糖干预M2亚型巨噬细胞24h,流式细胞术检测猪苓多糖对M2亚型巨噬细胞膜表面分子的影响,RT-PCR检测相关因子基因mRNA的表达量。4、不同剂量的猪苓多糖分组,分别作用于巨噬细胞株RAW264.724h后,流式细胞术检测猪苓多糖对巨噬细胞RAW264.7膜表面分子CD40、CD16/32、CD86的阳性表达率,ELISA检测药物干预巨噬细胞细胞上清中的因子TNF-α、IL-10、IL-1β、IL-6的分泌量,RT-PCR检测基因mRNA的表达量,探讨猪苓多糖对巨噬细胞的调节作用。结果:1、IFN-γ单独作用于细胞株RAW264.7,可以显著的提高M1亚型巨噬细胞膜特性性指标膜表面分子CD16/32, CD86的阳性表达率,可以显著的提高炎症因子的mRNA表达量和M1亚型巨噬细胞特异性指标iNOS的mRNA表达量,和空白对照组比较有统计学意义。2、猪苓多糖作用于M1亚型巨噬细胞,提高了M1亚型膜表面分子CD40的阳性表达率,对CD16/32, CD86作用不大;猪苓多糖可以显著的提高相关因子mRNA的表达量,提高相关细胞因子的分泌量,同时增加N0的释放量。3.20ng/ml的IL-4可以诱导M2巨噬细胞特异性指标的提高,成功的诱导了M2亚型巨噬细胞,给予猪苓多糖干预于诱导后的M2亚型巨噬细胞,可以减低CD206的阳性表达率,提高CD40,CD16/32的亚型阳性表达率,提高巨噬细胞炎症因子的相对表达量。4、猪苓多糖单独作用于细胞株RAW264.7膜表面分子的表达,和空白对照组比较,都提高CD40、CD16/32、CD86的阳性表达量,同时可以增加巨噬细胞TNF-α、IL-10. IL-1β.IL-6的表达量。结论:IFN-γ/IL-4可以诱导稳定的M1/M2亚型巨噬细胞模型,猪苓多糖可以增加M1亚型巨噬细胞炎症因子和抗炎因子的释放,可以影响M2亚型巨噬细胞向Ml方向转变,增加相关炎症因子的表达量,有着双向的调节作用。