拟南芥LrgB/PLGG1基因突变产生叶片花斑的机理研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangjj167
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
光呼吸是植物至关重要的代谢物修复通路,能让植物在当今有O2的大气中进行光合作用和CO2固定。参与光呼吸的酶蛋白和转运体蛋白主要分布于叶绿体、线粒体和过氧化物酶体。有关光呼吸的酶都已经知道,有关光呼吸的转运体所知相对较少。
  最近几年,拟南芥叶绿体内膜蛋白LrgB/PLGG1进入人们的研究视野。我们早期的研究发现,它调控叶绿体发育和程序性细胞死亡。随后,另有研究小组发现它可能是30多年来大家一直在找的一个光呼吸转运体:甘油酸/乙醇酸转运体。和已知的光呼吸突变体不同,lrgB/plgg1突变体(Col背景)只出现叶片花斑表型,并不出现整体萎黄和致死现象。虽然有不少拟南芥叶片花斑突变体如im、var2、chm和cue1等报道,但他们都不是光呼吸转运体。
  本研究旨在探求lrgB/plgg1基因突变产生叶片花斑的机理。首先,我们做了两个转录组学实验,既比较突变体花斑叶片和野生型正常叶片的差异表达基因,也比较花斑叶片的白色区域和正常叶片的对应区域的差异表达基因。关键差异基因的表达模式进一步用定量RT-PCR和启动子功能报告株系验证。其次,我们用CRISPR/Cas9基因组编辑技术制作了一个新的lrgB/plgg1突变体(Ws背景),以丰富研究用的遗传材料。最后,我们用EMS化学诱变lrgB/plgg1突变体(两种遗传背景),筛选LrgB/PLGG1基因的抑制突变,以发掘基因作用网络。
  结果表明,lrgB/plgg1突变体叶片从色氨酸合成芥子苷的相关基因表达上调,这些基因的上调是由转录因子MYB51的上调引起的。lrgB/plgg1突变体叶片中两种光呼吸相关的代谢产物丝氨酸和甘油酸大量累积。有意思的是,用外源丝氨酸和甘油酸处理野生型叶片,也能促进MYB51的上调和芥子苷的合成。对启动子功能报告株系进行GUS(β-葡萄糖苷酶)组织化学染色发现,MYB51在白斑区域的边缘部位高表达。而在白斑区域内部,有三个基因的表达量急剧上升,它们是PDF2.2(plantdefensin,PDF家族防卫蛋白),GLP3(germin-lileprotein,萌发素类似蛋白)和CLH1(chlorophyllase,叶绿素酶),但LrgB/PLGG1基因本身的表达被关闭,说明白色区域可能启动了细胞衰老和异养模式。借助二代测序和测序定位(mapping-by-sequencing),我们已经识别了LrgB/PLGG1基因的一个抑制基因,初步结果显示,同化物分配过程的改变是lrgB/plgg1突变体表型逆转的潜在原因。
其他文献
细分注水能够有效提高油田开发采收率,是保证油田稳产的重要开发方式之一,在一定程度上满足了不同油藏地质的开采需求。多级多段注水管柱处于三维弯曲井筒中,受力形式相对复杂,在现场作业过程中,由于不合理的管柱结构,且没有准确分析多级多段注水管柱的三维力学行为,导致作业工具产生严重磨损,缩短了作业有效期,降低了细分层注水成功率。因此,需要全面考虑多级多段注水管柱的三维井筒及作业工具的影响,科学地建立多级多段
断层的识别工作一直是地震勘探领域的重点。随着石油需求的增长,断层的识别方式从最初的手动解释到自动化属性解释,再到如今智能化的深度学习解释,其识别的精度和效率在不断地提高。为了进一步提高断层的识别效果,本文基于图像分割的思想,利用深度学习技术实现了断层的自动智能识别。聚焦于地震资料断层信息占比少的问题,一方面通过融合多种不同地质属性更充分地学习断层信息,另一方面,减少
一、研究背景  肿瘤细胞之所以能逃避免疫监视,其重要原因是缺乏免疫共刺激信号[1]。CD80是一种重要的免疫共刺激分子,参与机体免疫反应,刺激初始T细胞活化分化为辅助T细胞(Th),并且能调节免疫调节细胞(Treg)、免疫记忆细胞(Tm)、免疫效应细胞(Te)的作用,提供共刺激信号介导肿瘤免疫[2]。  霍乱毒素B亚基(CTB)是霍乱毒素与肠上皮细胞识别并结合的调节亚基,与神经节苷脂M1受体(GM
学位
雷帕霉素机制性靶蛋白(The mechanistic target of rapamycin,mTOR)是一种高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,其在体内能形成两种不同的复合物,分别是mTOR complex1(mTORC1)和mTORC2。尽管大量研究报道了mTOR信号通路在细胞生长、增殖、分化、存活、代谢等多个方面发挥重要作用,但mTOR在体内各种组织细胞中的生理功能远未阐明。本文运用Cre-l
背景:  骨关节炎(Osteoarthritis OA)是一种慢性关节退行性病变,在其发病过程中,关节软骨细胞出现变性坏死,胶原和蛋白多糖降解,基质金属蛋白酶和聚蛋白多糖酶的表达增加。由于骨关节炎的发病机理未完全阐明,目前临床药物仅能缓解OA症状,尚缺少有效延缓OA进展的药物。阐明骨关节炎的发病机制,对于寻找有效防治OA的药物靶点具有重要意义。DEPTOR是mToRC1和mTORC2的内源性抑制因
学位
由大斑刚毛座腔菌(Setosphaeria turcica)引起的玉米大斑病是世界玉米生产上的重要真菌性病害。迄今为止,对该真菌的遗传变异、生理分化、致病机制、发生规律及防治方法等已开展了大量研究。2013年3月全基因组序的完成为研究其分子进化、基因组成、基因调控、信号转导网络等方面奠定了坚实基础,也为后基因组时代的研究开辟了道路。转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子,深入
砷(arsenic,As)广泛分布于自然界,是一种常见的环境毒物和人类致癌物,能对植物产生严重的毒害作用。羊栖菜(Sargassum fusiforme (Hary.)Setehel)是一种重要的经济藻类,但是羊栖菜能在藻体积累大量的As,尤其是毒性较高的无机As,严重危害了羊栖菜的食用安全。研究羊栖菜中As的吸收代谢过程,鉴定和分离羊栖菜中与As响应相关的基因,有助于阐明羊栖菜对As吸收转运的机
学位
感音神经性耳聋通常是由于耳蜗毛细胞的不可逆损失导致的。目前,还没有合适的方法治疗由毛细胞的缺失导致的感音神经性耳聋。干细胞发育生物学的最新进展通过毛细胞再生提供了治疗感音神经性耳聋的希望。了解耳蜗前感觉上皮的发育形成将有助于我们探索毛细胞再生恢复听力的发育机制。在耳蜗前感觉上皮形成的过程中,通过早期Isl1,Gata3和他们的负调控因子Lmo4部分重叠的表达,我们假设一个耳蜗前感觉上皮形成的调控模
背景:阿尔茨海默氏症是一类神经系统退行性疾病,其主要的病理学表现之一是神经细胞外存在大量由淀粉样蛋白聚集而成的老年斑。β-淀粉样蛋白(Aβ)是老年斑的重要组成成分。β-淀粉样蛋白前体蛋白(APP)的转运机制是AD病理研究的重要内容,其在胞内存在多种分选转运途径,而且APP的转运及剪切异常会导致Aβ过多释放和积累,造成突触障碍、老年斑沉积和神经元死亡。以往关于APP转运机制的研究主要集中在非神经元细
γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)是一种由四个碳原子组成的非蛋白质氨基酸,于生物界中广泛存在。在动物中,它作为信号分子存在,是一种重要的抑制性神经递质。在植物中,生物胁迫(动物和昆虫咬食、微生物入侵等)或非生物胁迫(缺氧、盐胁迫、热胁迫、冷胁迫、干旱胁迫和机械损伤等)都能引起GABA快速积累。GABA通过一个较短的通路进行代谢,从三羧酸循环(TCA cycle