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本文以酿酒酵母GGSF16和GJ2008的单倍体作为融合亲本,对酿酒酵母GGSF16的单倍体原生质体进行紫外灭活,酿酒酵母GJ2008的单倍体原生质体进行热灭活,经PEG诱导灭活原生质体融合,获得了一株产酒精能力高于出发菌株的高产酒精酵母融合子。出发菌株的三角瓶酒精发酵实验结果表明,酿酒酵母GJ2008对初始总糖浓度为12.6%的甘蔗汁进行发酵,24h后酒精度为7.20%(v/v);酿酒酵母GGSF16对初始总糖浓度为21.5%的木薯粉醪液进行发酵,60h后酒精度为13.20%(v/v)。菌体的耐酸、耐糖和耐乙醇实验结果说明,两菌株正常生长的最低pH为3.0,该pH下酿酒酵母GJ2008的生长状况更好;两菌株正常生长的最高葡萄糖浓度为20%(w/v),该葡萄糖浓度下,酿酒酵母GGSF16的生长状况较好;两菌株正常生长的最高乙醇浓度为10%(v/v),该乙醇浓度下,酿酒酵母GGSF16的生长状况更好。对酿酒酵母GGSF16和GJ2008的子囊孢子形成和释放条件进行了研究,结果表明,在McClary培养基下22℃培养7d,酿酒酵母GGSF16和GJ2008的子囊孢子形成率分别为91.46%和87.20%;浓度0.3g/L的蜗牛酶37℃水浴8h,酿酒酵母GGSF16和GJ2008的孢子释放率分别为66.15%和67.35%。对孢子分离实验(60℃水浴10分钟杀死二倍体酿酒酵母的营养细胞)获得的酿酒酵母GGFS16和GJ2008单倍体及其相应二倍体细胞进行DNA含量,细胞质量和细胞体积的分析,结果说明获得的细胞是单倍体细胞。通过比较二倍体与相应单倍体的发酵性能,结果发现酿酒酵母GGFS16和GJ2008的二倍体细胞和单倍体细胞的发酵性能无太大差别,可作为双亲灭活原生质体融合的亲本。对酿酒酵母GGSF16和GJ2008单倍体原生质体形成和再生条件进行了研究,结果表明,培养8h的单倍体于37℃下预处理(预处理剂含0.2%β-巯基乙醇和0.1%EDTA-Na2)20min,再经0.15g/L的蜗牛酶37℃酶解30min,以170g/L的蔗糖为渗透压稳定剂,酿酒酵母GGSF16和GJ2008的单倍体原生质体形成率分别为98.14%和97.16%,再生率分别为17.29%和15.78%。对60℃灭活840s的酿酒酵母GJ2008单倍体原生质体和紫外线灭活70s的酿酒酵母GGSF16单倍体原生质体进行PEG诱导融合,融合率为2.7×10-6。经初筛,复筛和稳定性实验,最终获得了一株木薯粉酒精发酵能力略微高于出发菌株的融合子RH3。