人参有效活性成分的提取分离及含量测定

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人参是中外闻名、老幼皆知的名贵中草药材,被称为“百草之王”,具有补气生津的作用,适用于扶正祛邪,能够增强体质并具有抗病能力。本文考察了三种方法对人参皂苷提取率的影响、D101大孔树脂分离人参须皂苷、低聚糖和多糖并制定了人参须总皂苷质量标准草案。首先,研究三种提取方法对人参皂苷提取率的影响。本实验采用正交实验确立了闪式提取的最佳工艺为:提取3次、料液比1:20、提取时间3min/次,并通过验证实验确定了该方法的可行性。此外,还通过紫外可见分光光度法,高效液相色谱法以及电喷雾质谱法分析了热回流、超声、闪式提取三种不同方法对人参皂苷提取率的影响。总皂苷含量测定结果显示:闪式提取,热回流,超声三种提取方法的人参总皂苷提取率分别为1.8%,1.6%,1.4%。电喷雾质谱半定量分析显示,热回流提取物中二醇型皂苷相对强度之和为771.52%,三醇型皂苷相对强度之和为323.44%;超声提取物中二醇型皂苷相对强度之和为705.93%,三醇型皂苷相对强度之和为405.50%;闪式提取提取物中二醇型皂苷相对强度之和为791.82%,三醇型皂苷相对强度之和为316.24%。结果表明:在三种不同提取条件下,人参总皂苷提取率差别不大,但是所用时间却差别显著,其中热回流用时6h,超声用时30min,而闪式提取仅为6min,由此可见闪式提取效率最佳。其次,对D101大孔树脂对人参须皂苷和低聚糖的分离进行了研究。首先通过正交实验确立了热回流提取人参须皂苷和低聚糖的最佳提取工艺为:10倍体积80%乙醇热回流提取3次,每次1小时;由最佳提取工艺得到人参须提取液(0.2g/ml),使用D101大孔树脂对最大上样量、水洗脱体积和醇浓度及醇洗脱体积进行考察研究,得出D101大孔树脂分离人参须皂苷和低聚糖的最佳工艺条件为:最大上样体积为7/6倍柱体积,水洗脱体积为4倍柱体积,选取70%乙醇洗脱,洗脱体积为8倍柱体积。最后,对人参须总皂苷质量标准进行了研究。本研究采用紫外可见分光光度计法和高效液相色谱法对人参须总皂苷提取物建立了质量标准,并考察了精密度、重复性、稳定性、线性关系及加样回收率。为药材的质量控制提供了可行的标准。
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