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尽管抗血小板、强化降脂等冠心病二级预防措施在稳定性冠心病患者中逐渐规范和普及应用,但稳定性冠心病仍有较高的残余心血管风险(5%-10%)。如何进一步降低稳定性冠心病患者再发心血管事件,仍为目前面临的严峻挑战。以陈可冀院士为首的课题组通过大量前期研究发现,因瘀致毒、瘀毒致变是稳定性冠心病发生不良心血管事件的关键病机,并建立了冠心病稳定期因毒致病的辨证诊断量化标准。清心解瘀方是在瘀毒理论指导下根据陈可冀院士的经验方愈梗通瘀汤精简化裁而来,具有益气活血、化浊解毒的功效,但在西医常规治疗基础上联合用清心解瘀方可否进一步降低稳定性冠心病不良心血管事件发生风险仍缺少研究。针对这一问题,本研究以临床终点事件为主要指标,开展了清心解癖方干预稳定性冠心病的多中心、随机、双盲、安慰剂对照临床研究,并采用蛋白组学的方法对其可能作用机制进行了探索。研究一清心解瘀方对稳定性冠心病临床终点事件影响的多中心、随机、双盲、安慰剂对照研究目的:观察基于瘀毒理论组方的清心解癖方对稳定性冠心病再发心血管事件的影响。方法:采用多中心、随机、双盲、安慰剂对照临床研究设计,纳入1500例稳定性冠心病患者,将其按1:1比例随机分为清心解瘀方组(n=750)和安慰剂组(n=750)。清心解瘀方组在常规治疗的基础上加服清心解瘀方配方颗粒(每日2次,温水冲服),安慰剂组在常规治疗的基础上加服安慰剂(每日2次,温水冲服),共服药6个月,服药结束后继续随访6个月。主要复合终点事件为心源性死亡、非致死性心肌梗死、血运重建,次要复合终点事件为全因死亡、卒中、因不稳定性心绞痛/心力衰竭/恶性心律失常入院。结果:两组患者的性别、年龄、心血管危险因素等基线资料均无显著差异,具有可比性(P>0.05)。清心解瘀方组共有66例(8.67%)患者失访,安慰剂组有71例(9.47%)失访,两组失访率相似(P=0.65)。清心解瘀方组有5例患者发生主要复合终点事件,安慰剂组则有10例,清心解瘀方有降低主要复合终点事件的趋势(累积事件发生率:1.59%vs.1.62%;调整基线后 HR,0.41;95%CI,0.13-1.28;P=0.12),对次要复合终点事件也有降低趋势(累积事件发生率:1.2%vs.3.47%;调整基线后HR,0.41;95%CI,0.16-1.08;P=0.07),且非致死性心肌梗死发生率清心解瘀方组的显著低于安慰剂组(累积事件发生率:0.16%vs.0.82%;调整基线后 HR,0.82;95%CI,0.01-0.95;P=0.045)。由于血运重建的发生可能会受到主观因素的影,我们进一步比较了心源性死亡、非致死性心肌梗死、卒中这一常用复合“硬终点”事件发生情况,发现清心解瘀方可显著降低其发生率(累积事件发生率:0.31%vs.1.30%;调整基线后HR,0.06;95%CI,0.01-0.53;P=0.012)。复合终点事件(包括心源性死亡、非致死性心肌梗死、血运重建、卒中、因不稳定性心绞痛/心力衰竭/恶性心律失常入院)发生率清心解瘀方组也显著低于安慰剂组(累积事件发生率:2.84%vs.4.89%;调整基线后HR,0.43;95%CI,0.21-0.90;P=0.025)。12个月时,在男性患者中清心解瘀方组hs-CRP水平显著低于安慰剂组(P=0.03)。不良反应发生率两组并无差异(P=0.06)。结论:在西医常规治疗的基础上加用活血解毒中药清心解瘀方可以降低稳定性冠心病患者非致死性心肌梗死及“硬终点”事件(心源性死亡、非致死性心肌梗死、卒中)的发生率,并可降低包括心源性死亡、非致死性心肌梗死、血运重建、卒中、因不稳定性心绞痛/心力衰竭/恶性心律失常入院在内的复合终点事件的发生率,且安全性良好。研究二基于蛋白质组学清心解瘀方干预稳定性冠心病机制的初步研究目的:采用iTRAQ蛋白质组学技术对清心解瘀方治疗前后血清差异蛋白进行鉴定和分析,以初步探索清心解瘀方防治稳定性冠心病的作用机制。方法:在第一部分临床试验结束后,选取首都医科大学附属安贞医院分中心服用清心解瘀方(试验组)后hs-CRP水平明显降低的稳定性冠心病患者10例。选择其入组时及入组后3个月时存留的血清样本,随后将血清样本分为治疗前(A)和治疗3个月(B)两组,采用蛋白质组学方法鉴定清心解瘀方治疗前后的差异表达蛋白。并结合生物信息学分析方法对鉴定得到的差异蛋白进行进一步分析。结果:采用蛋白质组学方法共鉴定得到20个差异蛋白,其中4个差异蛋白上调,分别是 CASP8 和 FADD 样凋亡调节因子(CASP8 and FADD-like apoptosis regulator,CFLAR)、转铁蛋白(Serotransferrin)、载脂蛋白 A-Ⅳ(Apolipoprotein A-IV,APOA4)、神经粘附分子CHL1(close homologue of L1);下调的有16个,分别是补体因子B(Complement factor B,CFB)、载脂蛋白 B(Apolipoprotein B,APOB)、补体 Cls亚成分(Complement Cls subcomponent,C1S)、蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型1(Protein tyrosine phosphatase,non-receptor type substrate 1,PTPNS1)、木糖基转移酶 2(Xylosyltransferase 2,XYLT2)、生长激素受体(Growth hormone receptor,GHR)、蛋白轻链(Ferritin light chain,FTL)、含有 EH 结构域蛋白 3(EH domain-containing protein 3,EHD3)、补体 C4-A(Complement C4-A,C4A)、TGOLN2(Trans-Golgi network integral membrane protein 2)、中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(Mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor,MANF)、Ankyrin repeat domain-containing protein 23(ANKRD23)、补体 C2(Complement C2,C2)、角蛋白 6B(Keratin,type Ⅱ cytoskeletal 6B)、角蛋白 16(Keratin,type Ⅰ cytoskeletal 16)、角蛋白 A(HCG2039812)。通过生物信息学分析发现,这些差异蛋白涉及的GO功能条目除了调节免疫过程、胆固醇转运及脂蛋白的合成等生物过程外,还涉及铁离子的结合、由空泡形成引起的线粒体自噬、由线粒体去极化引起的线粒体自噬、巨自噬、线粒体降解、细胞器降解、铁离子的转运、支架蛋白的结合活性、细胞对生长因子的反应、胞吞的正向调节等分子功能或生物学过程等。对KEGG信号通路的富集分析发现,鉴定得到的差异蛋白主要在程序性坏死(necroptosisi)通路、矿物质的吸收通路和糖胺聚糖(硫酸软骨素/硫酸皮肤素)的合成通路3条通路显著富集。结论:清心解癖方可能具有稳定动脉粥样硬化斑块的作用,其机制与抑制动脉粥样硬化相关细胞的程序性坏死及凋亡、减少脂蛋白在内皮下的沉积及抑制补体系统的激活等有关。