目的:鉴于中药注射剂临床前免疫毒性结果高阴性率与临床不良反应频发的明显对比和过敏反应方法中ASA与PCA结果一致性差的情况，建立更为有效、灵敏性高、适合中药注射剂免疫毒性的检测方法;选用小鼠作为对中药注射剂过敏反应检测的实验动物，利用检测小鼠致敏血清中血液生物标志物的含量变化来进一步对小鼠过敏试验方法进行强化，选择除IgE以外能有效评价过敏反应发生的生物标志物;旨在寻找血液生物标志物与ASA/PCA结果间存在的相关性，用以提高方法灵敏度。　　方法:建立小鼠过敏试验方法:考察小鼠致敏后血液生物标志物变化情况，建立小鼠主动全身过敏反应模型及小鼠-大鼠异种PCA过敏反应模型;在此基础上，再选用OVA、BSA、TCS、DNP-BSA等其他过敏反应阳性药考察该模型的适用性情况;另与现行指导原则推荐方法比较;应用该试验方法对双黄连注射液和痰热清注射液的过敏原性进行检验。(1)方法学研究:以IgE为主要检测指标，考察阳性药物致敏剂量、佐剂的增敏剂量、致敏次数、产生抗体时效来确定小鼠过敏试验方法;(2)血液生物标志物的研究:考察不同过敏阳性药物致敏小鼠后体内抗血清中免疫球蛋白含量变化情况，考察对过敏阳性药物的适用性，考察与PCA&ASA结果相关性。小鼠ASA模型的建立: ICR小鼠背部皮下致敏，致敏末次后第11天进行激发，观察小鼠过敏反应症状，并初步制定小鼠主动过敏反应症状表及全身致敏性评定标准。小鼠-大鼠异种PCA模型的建立:致敏方法同ASA模型，末次致敏后的第11天获得抗血清，一方面利用ELISA方法进行血清IgE、IgG1的检测，荧光蛋白芯片进行IgA、IgD、IgM、IgG2a、IgG2b、IgG3多抗体检测，另一方面将血清按一定比例稀释后皮内注射到大鼠皮肤上，48h后含伊文思蓝染料的抗原攻击，考察皮肤蓝斑及蓝斑OD值情况，并对以上量化指标进行相关性评定。　　结果:　　(1)以血清抗体IgE含量为主要检测指标，确定小鼠过敏反应模型最优条件为OVA致敏量2mg/只，佐剂增敏剂量2％，最佳致敏次数3次，末次致敏后第11天为获得抗血清时间或进行ASA激发时间。小鼠-大鼠异种PCA宜选用蓝斑OD值作为主要参考指标，另需结合蓝斑直径进行共同评价，蓝斑OD值与小鼠体内IgE抗体含量二者极强相关，R2=0.972。　　(2)在PCA试验第一部分获得抗血清后进行的多抗体检测，发现除IgE以外，IgG1有较敏感的变化，可作为协同IgE检测鉴别过敏反应的生物标志物。　　(3)利用OVA、BSA、TCS、DNP-BSA共同验证小鼠过敏反应模型适应性情况，小鼠过敏反应模型较为稳定，结果验证适用性良好。血液生物标志物与小鼠ASA模型、小鼠-大鼠异种PCA模型相关性较好。　　(4)ICR小鼠过敏试验方法，其中小鼠ASA模型效果与指导原则推荐的豚鼠主动全身过敏反应模型效果相当。小鼠-大鼠异种PCA模型较指导原则推荐的大鼠同种PCA模型及小鼠耳异种PCA的敏感性高。小鼠过敏试验方法可靠且更敏感，更有效。　　(5)利用所建立的小鼠过敏试验方法对中药双黄连及痰热清注射剂进行过敏原性考察，结果显示该批号双黄连注射液过敏反应阳性，该批号痰热清注射液过敏反应阴性。　　结论:　　1.小鼠ASA模型与小鼠-大鼠异种PCA模型建立成功。　　2.所建立的小鼠过敏试验方法可靠且更敏感，更有效。　　3.对于中药注射剂过敏原性评价，小鼠过敏试验方法适应性良好且较为稳定。　　4.过敏反应的考察宜选用IgG1作为协同IgE对药物过敏原性进行考察的生物标志物。　　5.该模型适合作为评价中药注射剂过敏原性的检测方法。