TGFβ2基因多态性、孕妇吸烟与唇腭裂发生的关系实验目的 采用聚合酶链反应—单链构像多态性分析方法检测非综合症型唇腭裂及单发性腭裂患者 TGFβ2 基因的多态性，以探讨TGFB2 基因与唇腭裂发生的关系；调查分析母亲主动吸烟和被动吸烟与唇腭裂发生关系；联合分析 TGFβ2 多态性、母亲主动和被动吸烟与唇腭裂发生的关系。材料方法1. 收集血样：CL/P70 例、CPO40 例及对照组 40 例（单纯 颌骨骨折患者）；并调查母亲吸烟情况。2. 依据已发表的 TGFβ2 引物，采用 PCR 技术以全血 DNA 为模板，从病例组和对照组中扩增 TGFβ2 基因片段。3. 采 用 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 对 扩 增 的 基 因 片 段 做 DNA-PCR-SSCP 分析。4. 统计分析等位基因频率在各组间差异及母亲吸烟与唇 腭裂发生的相关性，并分析两因素的协同作用。5. 扩增的基因片段测序，检测 TGFβ2 多态位点。实验结果1. 从所有病例的血样中均扩增出 322bp 的 TGFβ2 目的片段。 - 37 -<WP=41>吉林大学硕士论文2. 在 SSCP 分析中，发现 TGFβ2 存在三种等位基因 A1、 A2、A3；统计学分析证实各基因型频率在 CL／P、CPO 和对照组间 P＜0.05。3. 基因测序发现 TGFβ2 的 3’端非编码区存在 ACA 重复 区，A1 含 7 个 ACA 重复区、A2 含 8 个重复区、A3 含 9 个重复区。4. 统计分析母亲主动和被动吸烟与 CL/P 和 CPO 的相关性 P＜0.05；联合分析母亲吸烟和 TGFβ2 多态性在唇腭裂 发生中的协同作用 P＞0.05。结论 TGFβ2 基因多态性与中国人 CL/P 和 CPO 发病有相关性；母亲主动和被动吸烟与 CL/P 和 CPO 发病有相关性；母亲吸烟与 TGFβ2 多态性在唇腭裂发生中无协同作用。