电针大肠俞募穴调整功能性便秘大鼠肠道菌群的机制研究

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目的:以功能性便秘大鼠为载体,以16S r DNA高通量测序为技术手段,研究电针大肠俞募穴对肠道动力的调节,及其对肠道菌群物种组成和丰度的影响,以期探索针刺大肠俞募穴治疗功能性便秘的机制,丰富俞募穴理论的科学内涵。方法:30只SD大鼠采用随机数字表的分配方式被分为空白组、模型组、俞穴组、募穴组和俞募穴组,每个组6只。采用复方地芬诺酯混悬液灌胃法制作功能性便秘大鼠模型并进行模型判定。俞穴组、募穴组和俞募穴组大鼠选取单侧大肠俞和/或天枢穴,每日左右交替针刺,进针后接电针20分钟,1次/日,连续干预10日;空白组和模型组采用同法束缚20分钟,不针刺。干预结束后观察各组大鼠一般情况和排便效应,在无菌环境下收集大鼠粪便,运用16S r DNA高通量测序技术,分析大鼠肠道菌群物种分类及多样性。结果:1.与空白组相比,模型组24h排便粒数明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05);俞穴组、募穴组、俞募穴组24小时排便粒数较之模型组均有所增加,其中以俞募穴组差异具有统计学意义(P<0.01),俞穴组、募穴组差异无统计学意义。俞穴组、募穴组、俞募穴组组间比较差异无统计学意义。与空白组相比,模型组24h粪便含水量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,俞穴组、募穴组、俞募穴组24小时粪便含水量均有所增加,其中募穴组、俞募穴组差异具有统计学意义(P<0.05),俞穴组差异无统计学意义。俞穴组、募穴组、俞募穴组组间比较差异无统计学意义。2.与空白组比较,模型组大鼠Alpha多样性无显著差异,Beta多样性PCo A分析显示菌群结构和组成在PC1维度有显著差异。广古菌门、疣微菌门、δ-变形菌纲(脱硫弧菌)、S24-7菌科、韦荣氏球菌属丰度明显增高,统计学具有显著性差异(P<0.05);芽孢杆菌纲(乳杆菌)丰度降低,统计学具有显著性差异(P<0.05)3.与模型组比较,俞穴组、募穴组和俞募穴组大鼠肠道菌群Alpha多样性均无显著差异,Beta多样性PCo A分析显示俞募穴组菌群结构和组成有显著差异。俞穴组帕拉普氏菌科(CF231菌属)丰度降低,差异具有统计学意义(P<0.05),普雷沃氏菌科、消化球菌科(rc4-4属)、螺旋杆菌科(螺旋杆菌属)、考拉杆菌属的丰度增高,差异具有统计学意义(P<0.05);募穴组帕拉普氏菌科、S24-7菌科、γ-变形菌纲丰度降低,差异具有统计学意义(P<0.05),芽孢杆菌纲(乳杆菌)、rc4-4菌属的丰度增高,差异具有统计学意义(P<0.05);俞募穴组γ-变形菌纲丰度降低,差异具有统计学意义(P<0.05),普雷沃氏菌科、消化球菌科(rc4-4菌属)丰度增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.功能性便秘大鼠存在肠道动力的减弱和肠道菌群的紊乱;2.电针大肠募穴、俞募配穴能调节功能性便秘大鼠肠道动力,增加大鼠排便量和粪便含水量;电针大肠俞穴、募穴以及俞募配穴均能调整功能性便秘大鼠的肠道菌群;3.电针大肠募穴增强肠道动力可能与增加乳杆菌的丰度,降低γ-变形菌纲的丰度有关;电针俞募配穴增强肠道动力可能与增加普雷沃氏菌科的丰度,降低γ-变形菌纲的丰度有关。
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