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目的:采用行为学和电生理学评价方法,探讨新生期母婴分离(MS)对幼鼠内脏痛觉敏感性影响;比较内脏高敏感性幼鼠和对照组幼鼠腰骶段脊髓背角Fos蛋白表达,探讨脊髓背角Fos蛋白异常表达在幼鼠内脏痛觉高敏形成中作用。方法:[1]20只SD新生大鼠随机分成MS组和对照组,每组10只;MS组新生大鼠予出生后第2~14天每天与母鼠分离3小时(8:00-11:00am),连续13天,对照组不予任何处理,与母鼠同笼。常规饲养到幼鼠期(6周龄),通过观察大鼠在不同压力结直肠扩张(CRD)刺激后的腹壁撤退反射(AWR)评分、内脏痛阈和腹外斜肌(EOMA)放电测量进行内脏痛觉敏感性评价,选取降结肠进行病理学检查。[2]32只SD新生大鼠按析因设计分成4组,每组8只,A组为MS组,6周龄未给予CRD, B组为MS组并在6周龄时接受CRD,C组为对照组并在6周龄接受CRD,D组为对照组,6周龄未给予CRD。B、C组幼鼠接受CRD刺激后2小时和A、D组幼鼠留取L6至S2脊髓,应用免疫组织化学染色及计算机图像分析系统进行脊髓Fos蛋白免疫阳性(FLI)细胞数和灰度积分值半定量分析。采用SPSS11.0软件包进行统计分析,α=0.05为显著性检验标准。结果:[1]随CRD增加,幼鼠AWR评分增加;AWR评分受新生期接受MS及性别影响(F值分别为26.53、9.24,p<0.001),雌性幼鼠AWR评分明显高于雄性,MS组明显高于对照组,性别与MS之间无明显交互作用;MS组与对照组AWR评分在CRD20mmHg、40mmHg、60mmHg时差异明显,CRD80mmHg时无显著差异。MS组和对照组幼鼠痛阈值(?x±s )为17.67±8.2mmHg、33.83±4.3mmHg(F=30.415,p<0.01)。[2]随CRD增加,幼鼠腹外斜肌放电波幅增加;腹外斜肌放电波幅受MS及性别影响(F值分别为18.83、7.62,p<0.05);雌性幼鼠腹外斜肌放电波幅明显高于雄性,MS组明显高于对照组,MS组与对照组腹外斜肌放电幅值在CRD15mmHg、30mmHg、45mmHg时有明显差异,CRD60mmHg、75mmHg时无显著差异。两组幼鼠降结肠未见明显病理组织损伤。[3]新生期MS和幼鼠6周龄时CRD均可使幼鼠腰骶段脊髓背角FLI细胞数显著升高,FLI细胞灰度积分值显著降低,差别均有统计学意义;MS和CRD对脊髓背角FLI细胞数及灰度积分值影响无交互作用。结论:新生期持续MS可导致幼鼠脊髓初级中枢敏化,接受伤害性CRD刺激后能显著引起脊髓神经元Fos蛋白高表达,造成大鼠痛阈下降,出现慢性内脏痛觉高敏感性,并且这种高敏感性能持续到幼年期,同时没有明显的组织病理学改变。