论文部分内容阅读
从油茶饼粕中可提取油茶皂苷(即茶皂素),其具有优良的乳化、稳定、发泡、持泡性等特性,同时也具有抗菌、抗炎、抗癌、溶血等生物活性。但油茶饼粕中成分复杂,含有大量的蛋白质、黄酮、单宁、多糖等物质,这给茶皂素的提取和纯化造成了较大的困难,也极大地影响了茶皂素产品的纯度、色泽,从而限制了其应用范围。目前主要应用于水产养殖、混凝土引气剂、日用化工等行业,而其药用、食品用价值仍未有效开发。因此研究行之有效的纯化和脱色方法能有效发挥其应用潜质,达到良好的社会效益和经济效益。由于目前仍然没有市售的油茶皂苷标准品,因此实验中采用AB-8大孔树脂进行纯化,用梯度乙醇溶液洗脱,并结合甲醇-丙酮重结晶法制得了高纯度的油茶皂苷。通过TLC薄层层析六种展开体系均为一点、紫外-可见光扫描光谱在210nm附近有较大吸收峰、三萜颜色反应、LC-MS峰形良好且保留时间为15.99min的物质的荷质比为1202、重量法检测纯度为99.3%等检验结果,确定此自制的油茶皂苷纯度高,可以作为定性、定量的分析对照品。用该对照品参照浓硫酸香草醛法绘制标准曲线,线性关系良好,作为后续实验的定量分析方法。实验采用无机陶瓷膜进行分离纯化,并以膜通量、油茶皂苷转移率、除杂率以及纯度为主要考察指标进行优化和评价考察膜孔径、操作压力、料液浓度等参数对分离纯化的影响,优化得出最佳分离纯化油茶皂苷工艺条件。结果表明,最优工艺条件为:使用膜孔径为0.05μm的陶瓷膜组件,操作压力为0.1MPa,料液浓度为1%的粗品茶皂素进行膜分离操作。通过使用优化得陶瓷膜纯化工艺,并进行纳滤浓缩和喷雾干燥,最终得到174.9g油茶皂苷样品。其纯度由原先不到50%的纯度提高到83.3%,产品得率为69.8%。茶皂素样品的颜色由原先的土黄色变成了乳白色,与此同时,其水溶液的色泽也有一定程度的改善,具有大规模工业生产的可行性。鉴于目前油茶皂苷脱色的难题,实验考察了漆酶脱色、还原脱色这两种新的脱色方法,并与目前脱色效果最好的H2O2氧化脱色法进行比较。结果表明,漆酶脱色法不适用于油茶皂苷的脱色,随着漆酶的加入,反应的进行,样品颜色呈现明显地劣化现象,溶液颜色加深且呈现出酒红色。而还原脱色则能起到明显的效果,在单因素实验的基础上,使用SAS9.1.3软件进行二次通用旋转响应面优化实验设计和分析,优化得出最佳的脱色工艺条件为:1.0%KBH4添加量、2.0%NaHSO3添加量、pH值为6.0,反应温度为40.0℃。该工艺条件下平均L*值为80.013,脱色率为51.819%。验证实验与模拟出的最佳工艺条件与实际值接近。通过与H2O2氧化脱色法进行比较可以看出,还原脱色法有更好的脱色效果,同时也具有更小的脱色剂使用量,且对油茶皂苷的结构没有破坏,不影响其表面活性,适宜于工业化生产的应用。