论文部分内容阅读
目的：SHP-1(又称为HCP)是-68kD，含有SH2结构域的非跨膜蛋白酪氨酸磷酸酶，它主要表达于造血细胞且作为关键的调控因子调节细胞内的磷酸化水平，SHP-1被认为是在白血病、淋巴瘤和其他肿瘤中的候选抑癌基因，由于SHP-1启动区的甲基化或SHP-1蛋白合成转录后阻滞，可导致不正常的细胞生长和各种肿瘤的发生。c-kit原癌基因是酪氨酸激酶受体家族Ⅲ类的一个重要成员，c-kit与干细胞生长因子(SCF)结合后与SHP-1偶联发生去磷酸化的细胞内反应，从而失去SHP-1的负性调控作用。此外，SHP-1基因影响细胞增殖与凋亡的传导路径。本研究旨在探讨SHP-1基因、c-kit基因的蛋白表达CDll7在白血病中的表达及对白血病患者的预后意义。
方法：研究对象包括68例白血病患者(包括33例初治AL患者、5例复发患者、13例慢性粒细胞白血病慢性期患者和17例缓解期患者)，30名健康人为正常对照。将其分为初治急性白血病组、缓解组、复发组、慢性粒细胞白血病组和正常对照组。应用半定量逆转录．聚合酶链反应(simi-quantity reVerse tanscription-polymerase chain reaction，RT-PCR)检测各组SHP-1基因的mRNA水平。并应用流式细胞仪检测c-kit基因的蛋白表达CDll7。
结果：
1、采用RT-PCR分析SHP.1mRNA的表达水平，流式细胞仪检测c-kit基因的蛋白表达CDll7。
1.1 SHP-1 mRNA在33例初治AL患者中8例表达阳性，基因平均相对表达水平(SHP-1/GADPH)为0.098，阳性率为24.24％，表达水平明显低于正常对照组(30例正常人中30例表达阳性，阳性率为100％，平均水平为3.081)，有显著性差异，P=0.00；急性髓细胞白血病(AMI，)组(表达率38％，平均表达水平0.190)与急性淋巴细胞白血病(ALL)组(表达率0％，平均表达水平0)均低于正常对照组。AML、ALL两组之间表达水平有统计学差异(P=0.037)。复发组(表达率0％，平均表达水平0)低于正常对照组(P=0.00)，且低于初治AL组(0.098)，无统计学差异(P=0.171)。SHP-1mRNA在17例缓解组中有10例表达阳性，平均表达水平为0.291，阳性率为58.82％，表达水平与正常对照组比较有统计学差异(P=0.00)，但表达高于初治AL组(0.098)，且差别有显著性，P=0.012。
1.2 CDll7在初治AL患者阳性率为66.67％ (22/33)，表达水平为71.4％，表达水平明显高于正常对照组(30例正常人中3例表达阳性，阳性率为10％，平均水平为11.7％)，有显著性差异，P=0.00；AML组(表达率62％，平均表达水平67.5％)与ALL上组(表达率11.1％，平均表达水平9.34％)均高于正常对照组。AML、ALL上两组之间有统计学差异(P=0.006)。复发组表达率为66.67％，平均表达水平66.8％，高于正常对照组(P=0.04)，与初治AL组相比无显著性(P=0.381)。CDll7在17例缓解组中有6例表达阳性，平均表达水平为46.2％，阳性率为35.29％，与正常对照组比较结果有显著性(P=0.015)。
1.3 SHP-1 mRNA在7例慢性粒细胞白血病慢性期患者表达率28.57％(2/7)，平均表达水平0.146，低于正常对照组(P=0.00)；CDll7表达阳性率28.57％(2/7)，平均表达水平28.6％，高于正常对照组，但无统计学意义(P=0.188)。在6例急变期患者中，出现SHP-1 mRNA的低表达(0)和CDll7的高表达(69.7％)，且与正常对照组分别存在统计学差异(P=0.00)；SHP-1与慢性期比较，无统计学差异(P=0.232)，CDll7与慢性期比较，有统计学意义(P=0.014)。
2、非参数相关分析表明，在AL中SHP-1与CDll7表达水平成负相关(r=-0.502，P=0.000)。
3、在33例初治AML，患者中，31例可进行疗效评估(2例早期死亡)。8例SHP-1阳性患者中6例达完全缓解(75％)，24例阴性患者3例缓解(12.5％)，SHP-1阳性患者的缓解率明显高于阴性患者且有显著性(x<2>=11.540，P=0.001)。9例ALL患者9例阴性，2例缓解。随访的31例初治AL中，CDll7阴性与阳性患者缓解率分别为58.33％(7/12)、10.53％(2/19)，两者有统计学差异(x<2>=8.192，P=0.008)。在AML中，CDll7阴性与阳性患者缓解率分别为80％(16/20)、12.5％(4/32)，两者有统计学差异(x<2>=23.692，P=0.000)；ALL中，CDll7阴性患者8例，2例缓解，阳性表达的缓解率为0。在7例SHP-1<-> CDll7双阴性组中，患者的缓解率为42.86％(3/7)，低于SHP-1<+>CDll7<+>双阳性组的缓解率66.67％(2/3)，差别没有显著性(P=0.490)。SHP-1<+>CDll7<+>组与双阳性组之间的缓解率无统计学差异(P=0.571)、SHP-1℃D117<+>组与双阳性组之间的缓解率有统计学差异(P=0.005)。7例复发的AL患者，只有1例用药后达到CR，其SHP-1、CDll7表达均阴性。余6例均未达到CR。
结论：
1 在初治急性白血病患者SHP-1呈过度低表达、CD117呈过度高表达，且两者的表达水平成负相关。
2 在慢性粒细胞白血病慢性期患者，SHP-1mRNA水平低于正常对照，有统计学意义；CD117水平高于正常对照，但无统计学意义。在急变期，出现SHP-1mRNA低表达和CD117的明显高表达。
3 SHP-1mRNA低表达、CD117高表达的患者缓解率低，表明与白血病的发病及疗效预后有关。可用来作为判断疗效预后的指标。