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目的:结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一。近二十年来我国结直肠癌的发病率逐年递增,居所有癌症的第三位。2012年我国新发结直肠癌患者人数已超过40万。早期发现,早期诊断,早期治疗是提高患者生存质量的关键。早期发现是早期诊断、早期治疗的基础。定期内窥镜检查、血清肿瘤标记物检测是目前早期发现的主要手段。然而,现有的结直肠癌标记物已难以满足早期诊断需要。依据肿瘤发生机制找到新的肿瘤预警标记物对早期诊断将有所帮助。大肠粘膜上皮细胞是不稳定细胞,总是处于不断的DNA合成、分裂、增殖状态,同时也不可避免受到肠内毒性物质的作用,DNA损伤不可避免。正常细胞有一套完整的DNA损伤修复系统以维护细胞基因组的稳定。错配修复(mismatch repair,MMR)和核苷酸切除修复(nucleotide excision repair,NER)是DNA修复系统中的两条重要途径。MMR系统由一组高度保守基因及其产物蛋白构成,其主要功能是纠正DNA复制、重组及基因损伤时出现的碱基配对错误。hMLH1和hMSH2是MMR系统中最为重要的两种基因。NER系统主要功能是修复那些影响区域性染色体结构的DNA损伤,涉及DNA双螺旋结构受损、紫外线导致的嘧啶二聚体及大分子致癌物导致的DNA加合物等DNA链上较大损伤。核苷酸切除修复交叉互补因子1(excision repair cross-complementingl,ERCC1)是NER系统中的标志性基因。现已证实Ki-67属于非组蛋白,表达于增殖细胞核,与细胞增殖密切相关,可作为反映肿瘤细胞增殖速度指标。本实验检测了MMR系统中hMLH1蛋白和NER系统中ERCC1蛋白在结直肠癌、癌前病变和正常大肠粘膜的表达情况,分析了其表达与肿瘤分化程度、临床分期、细胞增殖状况等患者临床病理参数间的关系,探讨这两种蛋白用于结直肠癌预警标记物的可行性。方法:免疫组织化学方法检测结直肠癌50例,癌前病变7例与正常大肠粘膜10例的Ki-67、hMLH1和ERCC1的蛋白表达情况。Ki-67蛋白表达高低代表肿瘤细胞增殖状态。在SPSS11.5统计软件上应用卡方检验和Fisher’s精确概率法分析这些蛋白表达与患者的性别、年龄及肿瘤的生长部位、病理分级、临床分期、肠壁浸润深度、淋巴结转移、细胞增殖状态的相关关系以及hMLH1与ERCC1表达间的相互关系。结果:Ki-67蛋白表达阳性率在高分化癌、中分化癌与低分化腺癌分别为24.00%、57.90%与66.67%,Ki-67蛋白表达与肿瘤分化程度呈显著负相关关系(P<0.05);Ki-67蛋白表达与患者的性别、年龄及肿瘤的生长部位、临床分期、肠壁浸润深度、淋巴结转移均无明确相关关系(P>0.05)。我们按Ki-67蛋白表达强度将肿瘤归为高表达组(21例)与低表达组(29例)。hMLH1蛋白表达阳性率在结直肠癌组为46.0%,显著高于正常大肠粘膜10%(P<0.05);在右半结肠癌为80.00%,显著高于左半结肠癌的55.56%及直肠癌的32.26%(P<0.05);在临床分期I期与II期分别为72.72%与52.94%,二者均显著高于III+Ⅳ期的27.27%(P<0.05);在高分化癌与中分化癌分别为64.00%与31.58%,二者均显著高于低分化癌的16.67%(P<0.05);在Ki-67高表达组为71.43%,显著高于低表达组27.59%(P<0.05);hMLH1蛋白表达与患者性别、年龄和肿瘤浸润深度、有无淋巴结转移无明确相关关系(P>0.05)。ERCC1蛋白表达阳性率在结直肠癌组织为54.00%,显著高于正常大肠粘膜10%(P<0.05);在临床分期I期与II期分别为81.81%与58.82%,二者均显著高于III+Ⅳ期的36.36%(P<0.05);在高分化癌与中分化癌分别为72.00%与42.11%,二者均显著高于低分化癌的33.33%(P<0.05);在Ki-67高表达组为76.19%,显著高于低表达组的37.93%(P<0.05);ERCC1的蛋白表达与患者性别、年龄和肿瘤生长部位、浸润深度、有无淋巴结转移无明确相关关系(P>0.05)。在结直肠癌中ERCC1蛋白表达与hMLH1蛋白表达显著正相关(P<0.05,r=0.227)。结论:1.部分结直肠癌癌细胞hMLH1、ERCC1表达增高,这种增高受细胞增殖影响;2.hMLH1、ERCC1表达与结直肠癌的发生、发展相关;3.hMLH1、ERCC1表达率与肿瘤分化程度、患者临床分期有关,可能成为结直肠癌的标志物。4.结直肠癌肿瘤hMLH1与ERCC1的表达常同时发生,联合检测二者表达可能有益于判断患者预后和制定化疗方案。