幽门螺旋杆菌("Helicobacter pylori",H.pylori)是一种革兰氏阴性微需氧菌,1983年被Marshsll和Warren首次成功分离,是当今世界上公认的感染率较高的上消化道疾病重要致病菌之一,多发于胃和十二指肠,是慢性胃炎的主导因素,易导致“消化性溃疡”,1994年被世界卫生组织(WHO)列为人类胃癌的Ⅰ类致癌源。人类是H.pylori的自然宿主,感染率为40%～80%,发展中国家的感染率普遍高于发达国家。研究表明,宠物主人与宠物之间可相互传播H.pylori,相互感染率最高可达100%。迄今为止,中国尚未有宠物H.pylori感染的流行病学调查以及相关的病例研究报告,详细调查它的流行病学特征以及对比研究相关药品的防治作用对于指导临床兽医有效地治疗H.pylori感染具有重要的临床价值。目的:(1)调查南京市犬H.pylori的感染率,分析其生活环境与感染率之间的关系,为宠物临床提供基础数据;(2)分离培养并鉴定H.pylori,进行药物敏感性试验,评估不同菌株抗生素耐药情况,为合理的选用抗生素提供参考;(3)比较普通三联用药与普通三联用药加益生菌疗法对犬H.pylori的根除疗效,为宠物临床选用更佳H.pylori治疗方案提供依据。方法:(1)从南京市选取不同环境下生活的犬共518例,采集直肠新鲜粪便,记录犬基本信息后,运用胶体金检测法大批量快速检测犬粪便样品,统计样品阳性率。随机选取部分粪便样品124份,提取基因组DNA,进行PCR扩增,分析比较H.pylori和螺杆菌的感染情况;(2)选取幽门螺旋杆菌感染阳性犬新鲜粪便样品24份,37℃C微需氧条件下分离培养到所需菌落数量后,进行细菌菌落鉴定,革兰氏染色镜检,脲酶,氧化酶,过氧化氢酶检测。对H.pylori确定菌株进行抗生素药敏试验,评估南京市犬感染的H.pylori对抗生素的耐药情况;(3)选取41例H.pylori阳性犬纳入A组治疗方案中,即三联用药:奥美拉唑0.4mg/kg +克拉霉素7.5 mg/kg+阿莫西林15 mg/kg,每天两次,疗程14 d;选取34例H.pylori阳性犬纳入B组治疗方案,即在A组用药方案的基础上添加益生菌,抗生素用药2h后,按照每千克体重0.8 g益生菌粉食。停药后4周,胶体金法检测犬粪便样品,比较各用药方案H.pylori根除率。结果:(1)南京市518份犬粪便样品中,有393份H.pylori阳性,阳性率为75.87%,南京市不同生活环境犬H.pylori阳性率范围为57.14%～80.65%。其中以流浪犬收容基地感染率最高(80.65%),住院犬感染率最低(57.14%),南京市宠物医院门诊的犬总阳性率为72.64%。PCR扩增结果显示螺旋杆菌属细菌阳性率为87.10%(108/124),H.pylori阳性率为76.61%(95/124),H.pylori占螺旋杆菌属的比例为87.96%(95/108);(2)24份犬新鲜粪便样品经分离培养鉴定后,得到15株H.plori确定菌株。药物敏感性试验结果显示喹诺酮类抗生素(如左氧氟沙星)和呋喃唑酮类抗生素(如呋喃唑酮)的耐药性最低,均为20%,克拉霉素、阿莫西林、甲硝唑耐药率分别为26.67%、33.33%和33.33%,其余抗生素耐药率更高,甚至达53.33%;(3)H.pylori动物根除试验中,A组回收20份结果,回收率48.78%,第一疗程H.pylori根除率40%,第二疗程80%;B组回收样品20份,回收率58.82%,第一疗程H.plori根除率为70%,第二疗程100%。结论:(1)南京市犬 H.pylori感染率同之前各地文献记载一致,且在感染的螺旋杆菌属中所占比例最高,犬感染H.pylori与其生活习惯和环境卫生状况密切相关;(2)减少犬抗生素预防性用药,降低细菌耐药性的产生,可采用左氧氟沙星替代标准三联疗法中的克拉霉素提高治疗效果;(3)H.pylori三联用药配合益生菌辅助治疗,或延长治疗时间均能够有效提高H.plori的根除率。