【摘 要】
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近年来,食品过敏已经成为新兴的公众健康问题,已经成为影响食品安全的重要因素之一。当前,国内外对过敏原胡桃和芹菜的检测方法研究仅处于初始阶段,为了保护消费者健康,本研究对胡
【出 处】
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中国科学院大学 中国检验检疫科学研究院 中国科学院生态环境研究中心
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近年来,食品过敏已经成为新兴的公众健康问题,已经成为影响食品安全的重要因素之一。当前,国内外对过敏原胡桃和芹菜的检测方法研究仅处于初始阶段,为了保护消费者健康,本研究对胡桃和芹菜的检测方法进行了研究。 在过敏原胡桃的检测方法研究中,建立了普通PCR检测方法、实时荧光PCR检测方法和ELISA检测方法,并通过试验对这些方法进行了验证。试验结果表明普通PCR方法和实时荧光PCR方法特异性强,在食品添加试验中,两种PCR方法对食品中胡桃成分的检测限分别为0.01%和0.001%,适合食品中胡桃成分的常规检测分析。在ELISA检测方法的研究中,首先利用提取的胡桃总蛋白制备的多克隆抗体建立了间接竞争ELISA方法,试验结果表明该方法的定量检测限(IC80)为94ng/mL且与美洲山核桃出现了交叉反应;另外,还利用表达的胡桃主要过敏原蛋白jug r1制备的多克隆抗体建立了间接竞争ELISA检测方法,试验结果表明该方法的定量检测限(IC80)为2.2ng/mL且与其它植物样品无交叉反应,在添加试验中,胡桃蛋白的回收率为74~95%,该ELISA方法具有检测敏感性高、特异性强和重复性好的特点,可用于食品中胡桃蛋白成分的常规检测分析。 在过敏原芹菜的检测方法研究中,将芹菜主要过敏原蛋白Api g1.01和Api g1.02进行了表达,并用表达蛋白制备单克隆抗体建立检测芹菜过敏原蛋白成分的夹心ELISA检测方法。
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