背景：胚胎干细胞(embryonic stem cells，ESC)是指从桑椹胚或着床前囊胚内细胞团分离的多潜能细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境，ESC都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。和在体的胚胎发育过程一样，ESC的自我更新和多向分化也是受多种细胞内蛋白因子和细胞外信号分子共同精细调控的结果。 视黄酸(Retinoic acid，RA)是维生素A的一种活性衍生物，在体胚胎发育中，内源性的RA参与了多种器官原基的形成，如心脏，脑等。RA也被广泛的应用在ESC体外诱导分化过程中。不同时段，不同浓度的RA处理能够诱导ESC分化成为多种不同的细胞类型。已有的研究主要集中在RA对于ESC向某些特化细胞类型的分化作用和机制上，这反映的是RA在发育过程中对器官组织形成的调控作用，对着床前胚胎的研究表明在囊胚阶段就有内源性RA-过性上调，而这种发育早期RA上调在胚胎发育过程中的作用尚不明朗。ESC来源于囊胚阶段的内细胞团，它的体外分化模型能够模拟在体胚胎发育过程，因此本课题利用ESC的体外分化模型来研究分化早期RA处理对胚胎发育的意义。 方法：本课题首先建立了ESC体外自发分化模型，通过分化早期短时程低浓度的RA处理ESC模拟发育早期着床前囊胚，通过碱性磷酸酶染色、未分化细胞特异性启动子驱动绿色荧光蛋白表达、未分化细胞特异性蛋白表达分析鉴定ESC状态；利用蛋白因子特异性中和抗体探讨在维持细胞未分化状态中的关键因子；采用特异性工具药和RNA干扰相结合方法研究RA短时处理对ESC分化命运决定的信号分子。 结论：在ESC分化早期，RA短时处理在诱导部分ESC分化为原始内胚层细胞同时可促使大部分ESC长期保持未分化状态，后一现象是由于RA促进分化细胞分泌LIF和Wnts因子，从而维持未分化细胞自我更新所导致的。此外，p38MAPK和ERK MAPK信号在RA诱导的ESC分化早期命运决定中起着重要作用。