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目的本研究围绕白细胞介素-6/Janus激酶2/信号转导和转录激活因子3/细胞因子抑制因子3 (Interleukin-6/Janus kinase 2/Signal transducer and activator of transcription 3/ Suppressor of cytokine signaling 3, IL-6/STAT3/SOCS3)通路,观察清肠化湿方对IL-6/STAT3/SOCS3通路及相关分子的调节,探讨该方治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法体外实验:予hTNF-α、LPS联合刺激诱导HT-29细胞炎症模型,将细胞随机分为6组,对照组,模型组,柳氮磺胺吡啶(Sulfasalazine,SASP)组,清肠化湿方高剂量组、清肠化湿方中剂量组、清肠化湿方低剂量组。ELISA法检测细胞上清液中IL-6的含量,Real TimePCR法检测细胞JAK2、STAT3、SOCS3mRNA相对表达水平,Western Blot法检测细胞p-JAK2、p-STAT3、SOCS3蛋白的表达情况。体内实验:用TNBS/无水乙醇制备小鼠结肠炎模型,40只小鼠随机分为对照组、模型组、SASP组、清肠化湿方组,连续给药7d后,取新鲜结肠标本,观察黏膜大体形态及组织学改变,ELISA法检测可溶性白细胞介素6受体(soluble interleukin 6 receptor,sIL-6R)含量,Real Time PCR法检测IL-6、糖蛋白130(glycoprotein 130,gp130)、JAK2、STAT3、SOCS3mRNA相对表达水平,Western Blot法观察结肠黏膜IL-6、gp130、p-JAK2、p-STAT3、SOCS3蛋白的表达情况。结果体外实验:与对照组相比,模型组细胞上清IL-6水平、细胞p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平增高,SOCS3 mRNA和蛋白表达增加。与模型组相比,清肠化湿方各剂量组细胞上清IL-6水平、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达明显降低(P<0.01),呈剂量依赖性,清肠化湿方高、中剂量组SOCS3 mRNA和蛋白表达较模型组上调(P<0.01)。各组JAK2、STAT3 mRNA表达未见明显差异(P>0.05)。体内实验:清肠化湿方对模型小鼠结肠大体形态及病理学评分均有改善作用。与对照组相比,模型组结肠上清sIL-6R含量,结肠IL-6、gp130、 SOCS3 mRNA和蛋白表达均明显增高,p-JAK2、p-STAT3蛋白表达上调(P<0.01),清肠化湿方组sIL-6R含量,IL-6、gp130mRNA和蛋白表达下调,p-JAK2、p-STAT3蛋白表达下调(P<0.01), SOCS3 mRNA和蛋白表达上调(P<0.01)。各组JAK2、STAT3 mRNA表达未见明显差异(P>0.05)。结论体外实验结果表明清肠化湿方可能通过上调HT-29细胞SOCS3,抑制JAK2、STAT3的活化,降低IL-6的分泌。体内试验结果表明清肠化湿方对小鼠实验性结肠炎有一定的改善作用,机制可能与上调SOCS3,抑制JAK2、STAT3的活化,抑制IL-6 trans-signaling信号转导又关。