长春花不仅是一种很有观赏价值的花卉,而且还是一种名贵的药用植物,中药可全株入药.含有100多种吲哚生物碱,多数具有生物活性,具有很高的药用价值.如阿玛碱、长春碱、长春质碱等.其中,长春质碱作为抗癌药物的合成前体,近年来受到人们的高度重视.目前,细胞培养技术被公认为是生产长春花药用成分最有效的途径.该文以长春花愈伤组织为实验材料,以长春质碱和阿玛碱为主要研究对象,并采用RP-HPLC法对长春质碱和阿玛碱进行分析测定;围绕提高其药用成分含量,生物鲜重产量及筛选稳定的细胞品系为中心,重点开展了EMS诱变、秋水仙碱诱变、吲哚生物碱的增产处理、积累规律分析等方面的研究.长春花二倍体愈伤组织和细胞的生长周期均可分为三个阶段:适应阶段、对数生长阶段和稳定阶段.适应阶段的愈伤组织细胞生长缓慢,吲哚生物碱含量也无明显变化;对数生长阶段以愈伤组织细胞的生长增殖为主;进入稳定阶段后,吲哚生物碱迅速积累.长春花悬浮培养细胞比愈伤组织生长周期短,生物产量高.EMS诱变细胞系研究发现,长春花愈伤细胞对EMS非常敏感,4小时处理,二倍体长春花愈伤细胞发生非整数倍变化,染色体由原来的16对变成96对左右;生理研究表明,诱变后的变异细胞系不仅生物产量高而且吲哚生物碱含量也高,阿玛碱含量提高了约1倍,间隔几代的生理性状也比较稳定.用秋水仙碱处理长春花愈伤细胞得到的四倍体细胞系优于对照细胞系,变异后的细胞系生物鲜重有显著的增加,最高生物产量可达33.0g/瓶,为对照的3倍,并且在吲哚生物总碱变化不大的前提下,目的药用成分长春质碱含量提高了8倍之多(液体培养).绿色愈伤组织培养发现,叶绿素的含量水平变化与激素比例和几种微量元素的浓度密切相关,当KT和NAA的浓度为1mg/L和0.5mg/L及钴、钼浓度为对照的7-8倍时,叶绿素含量高,绿色保持较为稳定,愈伤组织衰老缓慢.但药用成分变化不大,目的药用成分长春新碱未检测到.