转基因作物的多重PCR检测体系的研究

被引量 : 0次 | 上传用户:mai120117
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
随着转基因技术的发展与转基因作物的大量种植,转基因作物可能对人体健康、生物多样性和环境安全等方面带来的负面影响也逐渐引起了各国的关注。为此,欧盟、日本等国家开始对转基因作物实行强制性的标识制度,对转基因检测技术的特异性和准确性提出了严格的要求,转基因检测技术也成为研究热点。我国于2002年3月20日起施行《农业转基因生物标识管理办法》,要求对5类转基因生物所涉及的17种转基因产品进行标识,其中也包括了转基因棉花、转基因油菜籽、转基因玉米和转基因大豆四种农作物。因此建立一套方便、快捷的转基因产品检测技术是贯彻标识制度的重要前提。本研究以4类转基因作物为检测对象,以本课题建立的多重PCR引物设计方法为基础,建立起一整套包括四种多重PCR检测体系,主要取得的成果如下:1、以大豆内源基因Lectin、外源抗除草剂基因EPSPS、CaMV35S启动子和NOS终止子为检测对象,分别设计了四对引物,通过研究较佳引物终浓度配比和退火温度,建立了大豆转基因成分四重PCR检测体系。结果表明,建立的四重PCR体系可用于同时检测内源基因和转基因成分,稳定性好。2、以玉米内源基因IVR、外源抗除草剂基因(PAT)、抗虫基因Cry1Ab、筛选基因NPTⅡ、CaMV35S启动子和NOS终止子为检测的目的片段,通过研究较佳引物终浓度配比和退火温度,建立了玉米转基因成分七重PCR检测体系。结果表明,建立的七重PCR体系用于同时检测内源基因和转基因成分是可行的,检测方法效率高、稳定性好。3、以油菜内源基因PEP、抗除草剂基因(BAR、PAT)、筛选基因NPTⅡ、常见启动子(CaMV35S, FMV35S)和终止子NOS为检测对象,通过研究较佳引物终浓度配比和退火温度,建立了菜籽粕转基因成分多重PCR检测体系。结果表明,本研究所建立的检测体系能有效检测出菜籽粕以及其它作物(大豆、玉米、大米、棉籽)中的转基因成分,检测过程简便、准确,值得推广应用。4、以棉花内源基因sad1、报告基因GUS、外源抗虫基因Cry1Ab/Ac、筛选基因NPTⅡ、NOS终止子和CaMV35S启动子为检测对象,通过研究较佳引物终浓度配比和退火温度,建立了棉花转基因成分6重PCR检测体系。结果表明:采用本研究建立的棉籽基因组DNA提取方法,该6重PCR检测体系能够有效地从少至1颗棉籽的少量样品里检测出棉花中的转基因成分。5、本研究在多重PCR检测的过程中通过摸索建立起一套便捷、实用、效果优良的多重PCR引物设计体系,此多重PCR引物设计方法通过了先后多达45条的引物验证和数次引物调整的考验,克服了多重PCR引物设计上的困难,有较好的借鉴作用。本研究以上述四种作物转基因成分的多重PCR检测体系为基础,经多次重复验证研发出转基因作物多重PCR检测试剂盒,效果良好,适合推广并应用,可作为快速检测转基因植物及其产品中的转基因成分的可选方法。
其他文献
旅游购物已经成为旅游产业发展中的重要环节。因此,乡村旅游购物也将成为乡村旅游产业发展壮大、提高乡村旅游经济效益、推动乡村社区经济发展与产业结构调整的重要举措。通
顾客价值研究源于人们对新的更持久的竞争优势来源的不懈追求,随着越来越多中西方学者对顾客价值进行研究,顾客价值的概念和内涵不断丰富和完善,但是顾客感知价值识别和评价
20世纪以来,出于对传统文体规范的反对,国内出现了一种不同文体并置的著作。不同文体的著作名为“跨文体”,实际上总以一种文体为“主”,以其他文体为“次”。而不同文体并置
随着我国经济的可持续稳定的不断向前发展,人们的生活节奏步伐不断加快,速冻食品已经成为人们生活不可缺少的一部分。速冻食品行业已经成为国内外企业纷纷进军的主力,目前速
为了检测生物制品公司周边环境中噬菌体的种类及含量,以大肠杆菌(CMCC44102)为宿主菌,对生物制品公司污水处理厂污水样本中的噬菌体进行了分离纯化,并对纯化样本的一般生物学特
一、16PF的理论基础 十六种人格因素测验(简称16PF)是美国心理学家,人格特质理论代表人物卡特尔(R·B Cattle)经过多年的系统观察和科学实验,用因素分析法慎重确定和编制
<正>在当前校园中,特别是农村地区,欺凌伤害时有发生,因此,做好校园欺凌事件的预防,就显得尤为重要,本文将就农村校园欺凌伤害事件的成因及预防,做如下详细的分析。一、农村
以黄山风景区为研究对象,探讨相对封闭的区域山洪灾害风险区划方法的适用性。基于自然灾害风险评价理论,利用黄山风景区气象、社会经济、地理信息以及山洪灾情等资料,开展山岳型
文章在全面解读阿拉伯数学家萨拉夫·丁·图西(Sharaf al-Dīn al-Tūsī,1135~1213)《方程》(1209年)一书的基础上,着重分析了其中的三次方程数值解法,得出它们是在已有开方
利用Micaps3常规资料和地面七要素自动气象站和区域自动气象站降雨资料,对2010年6月23-24日黔东南州全州性暴雨天气过程进行诊断分析,结果表明:副热带高压东退,高原短波槽与