论文部分内容阅读
中药百合始载于《神农本草经》,其性平味甘微苦,无毒,入心、肺二经。能养阴清热,润肺止咳,宁心安神,治肺结核久咳、阴虚咳血。百合因“专治百合病,而得名”。中医将现代医学的抑郁症归属为百合病的范畴,有学者对中药百合抗抑郁的效果进行研究,结果表明百合具有抗抑郁的效果。本实验室对中药百合进行了初步药效学实验研究,表明百合总皂苷是百合抗抑郁症的有效部位。百合知母汤始见于张仲景《金匮要略.百合狐惑阴阳毒病证治》第三篇,方中百合七枚,知母三两。百合、知母伍用,治百合病误汗后,津液受伤,虚热加重,心烦口渴者。百合知母汤在临床应用广泛。郑水庆以小鼠悬尾和大鼠强迫游泳为动物模型,研究了百合知母汤的抗抑郁作用,结果表明百合知母汤和阳性对照药氟西汀类似,可以对抗小鼠、大鼠的失望行为,使小鼠尾悬挂的失望时间和大鼠强迫游泳的不动时间显著缩短,具有抗抑郁效应,且百合知母总皂苷是百合知母汤抗抑郁作用的活性成分之一本课题是建立在前期实验的工作基础上,以百合科植物卷丹为研究对象,从卷丹有效部位中分离获得了4个含量较高的百合甾体皂苷单体,并对其中的4个甾体皂苷成分进行了相应的结构解析或确认,分别为(25R)-26-O-(β-D-glucopyranosyl)-furost-5-en-3β,22R,26-triol-3-O-R-L-rhamnopyranosyl-(1-2)-β-D-glucopyranosyl-(1-4)-β-D-glucopyranoside ((25R)-26-O-(β-D-吡喃葡萄糖)-呋甾-5烯-3β,22R,26-三羟基-3-O-R-L-鼠李糖-(1-2)-β-D-葡萄糖-(1-4)-β-D-葡萄糖)、(25R)-26-O-(β-D-glucopyranosyl)-furost-5-en-3β,22R,26-trio-3-O-R-L-rhamnopyra nosyl-(1-2)-R-L-xylopyranosyl-(1-3)-β-D-glucopyranoside ((25R)-26-O-(β-D-吡喃葡萄糖)-呋甾-5烯-3β,22R,26-三羟基-3-O-R-L-鼠李糖-(1-2)-β-D-木糖-(1-3)-β-D-葡萄糖)、(25S)-spirost-5-en-3β-ylo-α-L-rha-(1→2)-[β-D-glu-(1→6)]-β-D-glu ((25S)-3β-羟基-螺甾烷-5烯-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖-(1→6)-β-D-葡萄糖)、(25R)-3β,17α-dihydroxy-5α-spirostan-6-one-3-O-α-L-rha-(1→2)-O-[α-L-arab-(1→3)]-β-D-glu ((25R)-3β,17α-二羟基-5α-螺甾烷-6-酮-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→2)-α-L-阿拉伯糖-(1→3)-β-D-葡萄糖苷),以此作为百合药材及相关制剂含测和质量控制的指标成分。研究富集百合总皂苷,百合知母汤总皂苷工艺:分别以分离获得的百合皂苷单体成分(25R)-26-O-(β-D-glucopyranosyl)-furost-5-en-3β,22R,26-trio-3-O-R-L-rhamnopyr anosyl-(1-2)-R-L-xylopyranosyl-(1-3)-β-D-glucopyranoside((25R)-26-O-(β-D-吡喃葡萄糖)-呋甾-5烯-3β,22R,26-三羟基-3-O-R-L-鼠李糖-(1-2)-β-D-木糖-(1-3)-β-D-葡萄糖)和知母皂苷BⅡ为对照通过显色法测定总皂苷的含量,通过对部分工艺因素考察,使总皂苷的含量达到50%以上,最终确立了较理想的富集工艺为:1.5倍量70%乙醇浸泡卷丹药粉约12h后,渗漉提取,控制外围温度50℃,流速不超过0.15BV/h,合并提取液,回收溶剂,加水稀释至0.12g/ml生药浓度,过滤,选用pipo-1大孔树脂加压吸附,上样液中药材与湿树脂质量比100:7,依次用20BV蒸馏水、3BV20%乙醇、3BV70%乙醇洗脱,收集70%乙醇部分,减压浓缩至干,在此工艺下得到的百合总皂苷,百合知母总皂苷的纯度达57%以上。采用高效液相-蒸发光散射(HPLC-ELSD)测定百合总皂苷和百合知母汤总皂苷中百合皂苷单体成分及知母皂苷BⅡ的含量,初步建立百合总皂苷,百合知母汤总皂苷质量标准。