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目的:探讨无血清处理对甲状腺癌TT细胞内Ca2+的浓度([Ca2+]i)变化及S100A13、FGF-1蛋白释放的影响,初步阐明Ca2+在S100A13、FGF-1蛋白释放过程中的作用。方法:采用Western-Blot检测无血清处理0h、1h、2h、4h、6h细胞内S100A13及FGF-1蛋白表达量,ELISA检测培养上清FGF-1蛋白浓度。应用激光共聚焦显微镜实时动态检测无血清处理TT细胞1h[Ca2+]i的变化。间接免疫荧光观察BAPTA-AM(2.5μmol/L)、EGTA(2.5mmol/L)对无血清处理6h细胞S100A13、FGF-1蛋白荧光分布的影响,Western-Blot检测S100A13、FGF-1蛋白表达量,ELISA检测培养上清FGF-1蛋白浓度。结果:Western-Blot结果显示无血清处理0h、1h、2h、4h、6h细胞S100A13、FGF-1蛋白表达量有逐渐下降趋势,0h、1h、2h组间比较无明显差异,4h组细胞S100A13、FGF-1蛋白表达与0h、1h、2h三组比较差异有统计学意义(P<0.05),6h组细胞S100A13、FGF-1蛋白表达与0h、1h、2h、4h组差异有统计学意义(P<0.01)。上述各时间处理组培养上清ELISA结果显示,0h、1h、2h、4h、6h组细胞培养上清中FGF-1浓度有上升的趋势,4h组与0h、1h、2h三组比较差异有统计学意义(P<0.05),6h组培养上清中FGF-1浓度较0h、1h、2h、4h组明显升高(P<0.01)。激光共聚焦Ca2+荧光显像结果显示:正常培养的TT细胞[Ca2+]i约0.1～0.3μmol/L,在扫描期间较稳定;无血清处理23min内保持相对稳定,23min后细胞[Ca2+]i迅速上升达到最大值1.6μmol/L,维持17min左右第40min缓慢下降至一个较低水平,第40min至第60min[Ca2+]i接近0.3～0.6μmol/L。1h内细胞平均[Ca2+]i明显高于正常培养组(P<0.05)。EGTA、BAPTA-AM能明显抑制无血清处理引起的细胞[Ca2+]i升高,平均[Ca2+]i与正常培养组差异无统计学意义。间接免疫荧光结果显示无血清处理6h细胞内S100A13、FGF-1蛋白荧光强度较正常培养组明显减弱;EGTA、BAPTA-AM能拮抗无血清处理引起这两种蛋白荧光变弱。Western-Blot结果显示无血清处理6h细胞S100A13、FGF-1蛋白表达量较正常培养组明显低,无血清处理同时加入EGTA、BAPTA-AM时细胞这两种蛋白表达量与正常培养组无明显差异;上述各组细胞培养上清ELISA结果显示无血清处理6h组培养上清中FGF-1浓度较其它3组明显增高(P<0.01)。结论:Ca2+可能与无血清处理对甲状腺癌TT细胞内S100A13及FGF-1的释放有关;Ca2+螯合剂EGTA、BAPTA-AM能有效拮抗无血清处理引起的TT细胞[Ca2+]i升高,并抑制S100A13、FGF-1的释放。