刺葡萄的组织培养研究

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刺葡萄(Vitis davidii Foex)是广西罗城野生葡萄之一,本研究以此为材料,主要研究其单芽茎段离体培养和叶片愈伤组织诱导与分化。结果表明:(一)茎段离体培养1外植体的灭菌方式:用0.1%升汞效果较好。2外植体的最佳取材方法:采用休眠枝沙培于干净的培养室,取其萌枝。3基本培养基:1/2MS和B5培养基都可用。4细胞分裂素6-BA和KT易引起刺葡萄褐变死亡,不宜使用这两者于该葡萄的组织培养。5初代培养: ZT浓度为1.0-2.0 mg/L配合低浓度的生长素NAA0.01-0.05 mg/L对腋芽的诱导效果最好。6继代培养:本实验中该葡萄没有产生丛生芽,培养基配方以B5+ZT1.0 mg/L+IAA0.01 mg/L最好,芽苗粗壮,繁殖倍数最高,达到2.01。7生根培养:该葡萄易诱导生根,最佳培养基配方为1/2MS+ IBA0.5 mg/L,生根率达100%。(二)叶片愈伤组织的诱导与分化1刺葡萄叶片再生植株难以获得,本试验未能从叶片诱导出再生植株。2叶片愈伤组织容易诱导。单独使用生长素NAA、IBA或细胞分裂素ZT都能从叶片诱导出愈伤组织。以细胞分裂素ZT与生长素NAA搭配使用诱导效果最好,诱导率高达100%。最佳诱导培养基配方为1/2B5+ZT1.0 mg/L +NAA0.01 mg/L,愈伤组织呈颗粒状,致密。此外,使用生长素NAA或IBA容易诱导叶片分化不定根,生长素在0-1.0 mg/L时,浓度越高生根率越高。3叶片愈伤组织的继代培养:使用ZT 1.0-2.0 mg/L与低浓度生长素(0.005-0.05 mg/L)配合使用能保持致密、颗粒状,有活力的愈伤组织。该葡萄用单芽茎段做启动培养外植体时,容易受消毒剂的毒害,也容易发生脱节断裂,严重影响成活率。其属于对培养基适应范围窄的类型,培养过程中容易愈伤组织化,需要有严格的适宜培养基,其增殖倍数才能达到要求。需要更进一步试验才能达到快繁目的。
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