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研究背景:急性髓系白血病(AML)是一组临床和生物学行为存在高度异质性的疾病。AML的发生是由髓系白细胞增殖失控、分化障碍和凋亡抑制所致,这其中涉及一系列基因的改变,如染色体易位、重排、点突变、缺失、基因修饰如甲基化等,导致癌基因的激活和抑癌基因的失活。近年来,随着人们对表观遗传学认识的深入,尤其是去甲基化药物阿扎胞苷(azacitidine)及其脱氧衍生物5-氮杂2′-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine)在治疗肿瘤患者的成功临床应用,表观遗传学逐渐成为肿瘤研究的热点。MicroRNA(miRNA);是生物体内源长度约为18-25个核苷酸的非编码小RNA,通过表观遗传的方式调控生物体的正常生长、发育、衰老、死亡,以及疾病的病理过程。作为一个广泛存在的可对基因表达进行微调的分子,其在急性髓系白细胞增殖和分化中的意义近年来开始受到关注。诱导白血病细胞重新分化是白血病治疗的主要策略之一,使用全反式维甲酸(all-trans retinoic acid, ATRA)能使70-80%以上的急性早幼粒细胞性白血病(acute promyelocytic leukemia, APL)患者得到完全缓解,而联合化疗可获得长期缓解,甚至有可能治愈。而miRNAs参与APL细胞分化的调控机制还未完全阐明,尤其是对于PML-RARa融合基因阴性的急性髓系白血病细胞。因此,本实验应用实时荧光定量聚合酶链反应技术(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction, real-time PCR)对miR-26在ATRA诱导急性髓系白血病细胞HL-60粒系分化中的表达进行研究,为了解miR-26在分化调控过程中的作用机制提供实验依据。目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)诱导HL-60细胞分化对miR-26表达的影响。方法:以全反式维甲酸(1μM)影响下不同时间的HL-60细胞为检测对象,采用显微镜下观察细胞形态学改变;流式细胞仪检测细胞表面分化标志CD15; Real-time PCR检测不同时段miR-26的表达变化。结果:1)随着药物诱导时间的延长,被诱导的HL-60细胞向粒系分化,并出现细胞核形的改变;2)与对照组相比,ATRA作用3d、4d、5d和6d后,流式细胞仪检测HL-60细胞的分化率分别(52.39±3.56)%、(77.65±0.24)%、(83.90±1.30)%、(68.13±1.67)%,(P<0.01); 3) Real-timePCR检测miR-26A、miR-26B的表达水平,5d时其表达水平显著上升,miR-26A、miR-26B的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-26A、miR-26B在ATRA诱导HL-60细胞粒系分化中表达显著升高,提示miR-26可能参与急性髓系白血病细胞粒系分化调控。