研究背景结直肠癌（Colorectal Cancer,CRC）是最常见的消化道恶性肿瘤之一。肝转移是CRC相关死亡的主要原因,目前缺乏有效的治疗手段,且机制未明。因此,探索CRC肝转移的关键分子具有重要的临床意义。多项研究报道血管生成素类似蛋白1（Angiopoietin-like proteins,ANGPTL1）在肿瘤组织中表达下调,能够抑制肿瘤细胞的转移能力。然而,ANGPTL1在CRC中的作用仍不清楚。因此本文将阐明ANGPTL1在CRC中的表达情况及生物学功能,重点探究ANGPTL1对CRC肝转移的作用及分子机制。研究方法首先,我们通过分析TCGA和GEO数据库及本中心组织样本的基因表达谱明确ANGPTL1在CRC中的表达情况及其和患者预后的关系。然后,我们通过慢病毒转染构建ANGPTL1过表达和敲低的CRC细胞,并通过细胞功能实验和小鼠皮下成瘤及肝转移模型研究ANGPTL1对CRC细胞增殖、运动及转移能力的作用。接着,我们通过GEO数据库筛选了受ANGPTL1调控的mi RNA,并利用mi RNA类似物和抑制剂探究ANGPTL1抑制CRC转移的分子机制。此外,有研究显示ANGPTL1能够以外泌体的形式分泌,因此我们进一步探究外泌体ANGPTL1对CRC的作用和机制。我们首先通过超速离心法分离了CRC组织来源的外泌体,并使用Western blot（WB）检测了外泌体ANGPTL1蛋白的表达情况。然后,我们利用ANGPTL1过表达的CRC细胞获得携带高水平ANGPTL1的外泌体,并且通过小鼠眼球后注射实现外泌体教育。接着,我们借助经脾肝转移模型和体内血管渗漏实验研究外泌体ANGPTL1对CRC肝转移及转移前微环境（Pre-metastatic Niches,PMNs）的影响。最后,我们通过转录组测序探索外泌体ANGPTL1对Kupffer细胞（KCs）基因表达及受到调控的信号通路,并利用q PCR、WB和细胞功能实验验证分子机制。研究结果1.相较于正常肠道组织,ANGPTL1在CRC组织中的表达量降低。肿瘤中ANGPTL1低表达的CRC患者较ANGPTL1高表达的患者生存时间更短。2.过表达ANGPTL1后,CRC细胞迁移、侵袭和肝转移能力减弱;敲低ANGPTL1则相反。改变ANGPTL1表达后,CRC细胞的增殖能力没有明显变化。机制方面,ANGPTL1上调CRC细胞中mi R-138;干扰mi R-138表达能够逆转ANGPTL1介导的CRC细胞迁移抑制。3.相较于正常肠道组织,CRC来源的外泌体中ANGPTL1蛋白水平降低。携带高水平ANGPTL1的外泌体使小鼠肝脏PMNs中的血管渗漏明显减弱、CRC肝转移负荷显著减少。携带高水平ANGPTL1的外泌体主要被肝脏KCs摄取,并且调控KCs分泌谱,通过抑制KCs的JAK2-STAT3信号通路下调MMP9表达。阻断KCs的MMP9下调能够逆转携带高水平ANGPTL1的外泌体对肝脏PMNs血管渗漏的抑制作用。研究结论1.ANGPTL1在CRC组织中表达下调。肿瘤中ANGPTL1的表达量与CRC患者预后呈正相关。2.ANGPTL1通过上调mi R-138抑制CRC肝转移。ANGPTL1对CRC细胞的增殖没有影响。3.CRC来源的外泌体中ANGPTL1蛋白水平下调。外泌体ANGPTL1通过抑制KCs的JAK2-STAT3-MMP9轴阻止肝PMNs的血管渗漏进而减弱CRC肝转移。