目的：甘油二酯激酶(diacylglycerol kinase, DGK)通过磷酸化甘油二酯(diacylglycerol, DAG)为磷脂酸(phosphatidic acid, PA)调节细胞的生理病理活动；肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor a, TNFα)是促炎症细胞因子,参与炎症反应。本实验建立大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)模型,检测DGKζ和TNFα在脑干和脊髓的蛋白水平、细胞定位和分布的变化,探讨DGKζ在EAE发病机制中的作用,为临床治疗多发性硬化症提供新方法。方法：应用豚鼠脊髓匀浆诱导Wistar大鼠EAE模型,用免疫蛋白印迹法、免疫组织化学和免疫荧光双标技术检测DGKζ和TNFα在EAE不同病理阶段中脑干和脊髓内的蛋白水平、细胞定位和分布变化。结果：1.免疫蛋白印迹结果显示：DGKζ和TNFα在EAE大鼠脑干和脊髓中的表达变化均为：在1-2分组表达量均显著低于正常组(P<0.05),在3分组又显著升高(P<0.05),4分组持续升高,但与3分组相比无明显差异(P>0.05)。2.免疫组化和免疫荧光双标结果显示：(1)在正常组大鼠脑干和脊髓DGKζ均主要在神经元的细胞核阳性表达。在1分和2分组,脑干和脊髓中DGKζ阳性细胞数量明显减少,但在3分和4分组DGKζ在神经元的表达又增多,并且在大量活化的小胶质细胞呈阳性表达。在正常和各病理组大鼠脑干和脊髓中,DGK班脑干纤维状结构均呈弱阳性表达,但在脊髓白质表达较强。(2)TNFα在正常组大鼠脑干呈阳性表达在细胞浆,纤维状结构也呈阳性表达；在1分和2分组脑干内,TNFα阳性细胞减少,仅表达在细胞核周；在3分和4分组脑干中TNFα表达又增强,呈强阳性表达在胞核中,且阳性细胞数量明显增多,纤维状结构均呈阳性表达。在正常组和各病理组大鼠脊髓白质和灰质神经元的胞浆、运动神经元的突触扣结呈强阳性表达。(3)免疫荧光双标显示在TNFα和DGKζ在神经元和纤维状结构中共表达。结论：1. DGKζ表达量在1-2分组显著降低,在3分组又显著增高,提示3分时期可能是DGKζ参与EAE病理变化的一个重要时期。2. DGKζ在神经元和活化的小胶质细胞的表达变化提示该亚型在EAE病理变化过程中有重要作用。3.DGKζ和TNFα的蛋白水平变化一致并在神经元和纤维状结构中共表达,提示DGKζ和TNFα可能有相互作用。