丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus，HCV)经血液传播引起的慢性传染性疾病在全球流行，它是引发全球慢性肝炎、肝硬化和肝癌的主要原因。到目前为止并没有有效的预防保护性疫苗，治疗手段容然受限制。而现在常用的聚乙二醇干扰素-α和利巴韦林结合的治疗手段，也只是对50％的病人有效力，最终患者长期伴随有慢性肝炎、肝硬化甚至肝癌的后遗症。包膜糖蛋白E1作为HCV的结构蛋白之一，具有重要的受体结合位点、抗原表位作用，在病毒生命周期和宿主免疫过程中发挥重要作用，因此包膜蛋白普遍被认为是疫苗研究的靶标。　　 本课题通过生物信息学分析对HCV E1基因进行全面了解，利用分子克隆手段将HCV的结构蛋白E1基因分别构建到原核和真核表达载体上，并分别在其中表达。通过结果比较显示，E1在原核中单独表达(重组质粒DET-28a-E1)时检测不到目的条带，但通过与多角体融合后(重组质粒pET-28a-polh-E1)可以大量表达，为包涵体形式，在50 kD左右有明显的条带。利用多角体的溶解性质采用调节pH以及Ni柱亲和层析纯化的方法，都可以纯化得到目的蛋白。　　 杆状病毒表达系统作为一种常用的真核表达系统，不仅能够大量表达外源蛋白，而且具有转录后加工的能力，表达的蛋白为可溶性蛋白，能够保持天然的活性。E1基因通过Bac-to-Bac表达系统在家蚕BmN细胞和五龄幼虫中表达时，都能得到不同程度糖基化的部分可溶性蛋白，分子量为26～35 kD。通过抗体亲和层析或凝胶过滤层析、ELISA与抗体亲和层析等相结合的方法能够较好的从细胞和蚕血淋巴中纯化得到E1蛋白。这将解决HCV疫苗研究中无法获得大量天然的病毒蛋白的难题，为HCV疫苗的进一步研究提供重要的参考和依据。　　 通过糖苷酶酶切对纯化得到的E1蛋白进行去糖基化分析，能够得到分子量为21～26 kD之间的蛋白，较酶切前分子量减小5～10 kD。这些不同大小分子量的蛋白说明E1在真核表达系统中得到了不同的糖基化修饰。通过进一步深入研究HCV E1的性质及特点，将有助于HCV疫苗的设计研究和制备，同时对筛选抗病毒药物，阻止HCV病毒进入宿主细胞起到重要作用。