复方ItterfilBaras的工艺优化及对A375细胞的作用研究

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目的:对复方依特日非力白热斯的工艺进行优化,通过体外培养正常人黑素细胞及血清药理学方法,研究维吾尔药复方依特日非力白热斯含药血清对细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素颗粒合成的影响;探讨复方依特日非力白热斯对黑素细胞的作用及阐述其治疗白癜风的可能机理。方法:采用正交设计,优化复方依特日非力白热斯的制备工艺;以不同剂量给大鼠持续灌药3天,于末次给药1h,2h,3h,4h采血,制备含药血清,加入体外培养正常人黑素细胞体系,分别采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)和多巴速率氧化法测定含药血清对A375黑素细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素颗粒合成的影响。结果:同一剂量持续给药3天,末次给药后分别于1h,2h,3h,4h采血,各组含药血清均可促进A375细胞增殖;末次给药后1h的含药血清促进A375黑素细胞增殖作用最明显,与对照组相比具有统计学差异(P<0.05);而末次给药2h、3h、4h后含药血清的作用逐渐减弱。提取组及粉碎组各剂量含药血清均有促进A375细胞增殖的作用,并呈剂量依赖性;提取物高剂量组(2.250g/kg)、中剂量组(1.125g/kg)均优于生药粉碎组。与对照组相比,提取物中、高剂量组均有统计学差异(P<0.05)。提取组及粉碎组各剂量含药血清均可提高A375细胞酪氨酸酶活性,与对照组相比,各给药组均有统计学差异(P<0.05),并呈剂量依赖性。与对照组相比,提取组高(2.250g/kg)、中(1.125g/kg)、低(0.563g/kg)以及粉碎高剂量组能够极显著提高酪氨酸酶活性(P<0.01)。提取组及粉碎组各剂量含药血清均可增加A375细胞黑素颗粒含量;与对照组相比,粉碎组高(2.250g/kg)、中(1.125g/kg)、低(0.563g/kg)3个剂量组随着药物浓度的增加,黑素含量也明显升高;而提取组的低(0.563g/kg)剂量组在促进黑素颗粒生成的作用最强。与对照组相比,各给药组均有统计学差异(P<0.05)。结论:通过工艺优化可以充分提取各药材中的有效部位(群),能够明显提高复方依特日非力白热斯对A375细胞增殖,酪氨酸酶活性及黑素颗粒合成的作用;同一剂量时,优化工艺制备的提取组含药血清对黑素细胞的作用优于原工艺制备的粉碎组含药血清。不同剂量的复方依特日非力白热斯各组含药血清均可以促进A375细胞增殖,提高酪氨酸酶活性及黑素颗粒合成;以末次给药后1h采血时含药血清作用最为明显;其中各组含药血清激活酪氨酸酶活性的作用最强,并成剂量依赖性。推测复方依特日非力白热斯可能通过这一途径达到治疗白癜风的作用。
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