乙烯和光对拟南芥下胚轴伸长的影响与离子芥未知蛋白功能初探

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乙烯和光通过特有的信号机制共同调控着高等植物的生长发育。外源添加乙烯前体1-氨基环丙烷-1-羧酸(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid, ACC)在黑暗条件下可以显著抑制胚轴伸长,但是在光照条件下可以促进其伸长。乙烯能够调节生长素的含量,而生长素对植物发育形态影响很大。然而,乙烯在黑暗条件下和光照条件下对胚轴不同作用的机制仍不清楚。本文初步探讨了乙烯在拟南芥下胚轴伸长中相反作用的关键因子。结果显示,乙烯不能在光照条件下促进拟南芥生长素不敏感突变体(tir1-1, axr1-3和axr1-12)的下胚轴伸长,但是能够抑制生长素不敏感突变体在黑暗条件下胚轴的伸长。DR5启动子是一个人工合成的生长素响应启动子,常常用来定量反应生长素的响应情况。在光照条件下,ACC处理下DR5-GFP转基因系的荧光强度比对照显著增强,但是在黑暗条件下DR5-GFP转基因系的荧光强度没有增强。COP1(CONSTITUTIVELY PHOTOMORPHOGENIC1)是光信号通路中非常重要的组成元件。而EIN3(ETHYLENE-INSENSITIVE3,一个乙烯调节的转录因子),能够直接调节ERF1(ETHYLENE-RESPONSE-FACTOR1)的转录。ACC处理下拟南芥突变体cop1-4和cop1-4/EIN3ox转基因系在黑暗条件下均具有较长的下胚轴。黑暗条件下,ACC能够诱导ERF1在cop1-4突变体中的表达,但是不能诱导其在野生型中的表达。综上所述,乙烯调节生长素促进胚轴伸长的过程是受光调节的,而且COP1能够显著影响一些EIN3下游基因的转录,所以COP1在乙烯对胚轴伸长不同作用中起着至关重要的作用。高山离子芥是一种生长在高海拔,高纬度的十字花科植物,因其生存环境(昼夜温差大,紫外辐射强等)十分恶劣,使其拥有独特的抗逆机制。因此,高山离子芥是研究与发现新的抗逆蛋白尤其是抗寒蛋白的理想模式植物。为此,我们克隆了四条未知功能蛋白(Cb76600、Cb56880、Cb18740、Cb29780)全长CDS序列。它们同拟南芥相应的未知蛋白同源性非常高(一般80%以上),且都能被低温诱导,据此,我们利用模式植物拟南芥相应未知蛋白研究这些未知蛋白的功能。主要结果如下:经过预测At1g18740可能定位于细胞核内,且拥有一个棒状的三级结构。At1g18740的N端残基和At5g52250有直接的相互作用。虽然At5g52250也是一个功能未知蛋白,但是已经证明它同ABA信号通路中的CDPK11有直接的相互作用。Salk020993是At1g18740的T-DNA插入突变体,具有生长较缓、易衰老、对春化作用不敏感,对ABA敏感性较弱。ABA相关基因在Salk020993和野生型对ABA响应一致。但ABA能诱导ABI2在Salk020993中的大量表达。Atlg18740相关突变体都对春化不敏感。基因芯片结果显示,在Salk020993中ABA信号通路三个负调基因下调,分别是WRKY40,ERF4、CYP707A3。上述结果表明Atlg18740可能是ABA信号通路中负调控ABA的元件,它对植物响应ABA的响应过程影响不大。
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