论文部分内容阅读
本课题通过检测急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)小鼠模型血清中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白介素(interleukin,IL)-10、IL-12水平变化、脾脏中树突状细胞(dendritic cells,DCs)的分化以及胰腺组织病理改变,探讨以下几个问题:1.一定浓度范围内的尼古丁可以显著减低急性胰腺炎的炎症反应程度;2.一定浓度范围内的尼古丁可以降低AP小鼠的死亡率;3.尼古丁可能是通过诱导DCs向CD11clowCD45RBhigh DCs的分化从而改善急性胰腺炎的预后。选取BALB/C小鼠100只,按照随机分配原则将动物分为正常对照组、AP组、尼古丁干预组(0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.3mg/kg),再随机分成0h、12 h、24h、48 h、96 h五个亚组,每个亚组4只小鼠。分两次腹腔注射8%L-精氨酸(40mg/kg),间隔1小时,建立小鼠急性胰腺炎模型,对照组按同样方法注射0.5ml生理盐水。于每个时间点摘除眼球取血,取胰腺组织做病理检测。用流式细胞仪分析脾脏中DCs亚群表面共刺激分子CD40、CD80、CD86及主要组织相容性复合物(MHC)-II的表达,血清中细胞因子IL-10、IL-12以及TNF-α的表达水平按ELISA试剂盒说明书进行检测。此外,另取96只小鼠,随机分成四组,每组24只。在模型制作前1h腹腔注射等量的生理盐水和不同浓度尼古丁(0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.3 mg/kg),每12小时观察小鼠死亡率,并详细记录小鼠死亡情况,最长观察时间为8天。尼古丁明显增加了小鼠脾脏CD11clowCD45RBhigh DCs的数量,并呈现一种剂量依赖关系;与AP组相比,尼古丁刺激后AP小鼠血清中细胞因子IL-12以及TNF-α的表达水平明显减低,而IL-10的水平却得到提高,并且呈剂量依赖关系(p<0.05);尼古丁的干预明显减弱了AP中胰腺组织的损害;0.1 mg/kg、0.2 mg/kg尼古丁对生存率的改善不明显,0.3 mg/kg尼古丁显著增加了AP小鼠生存率(p<0.01)。一定浓度范围内,尼古丁可以显著降低AP小鼠体内的炎症反应程度以及胰腺组织损害,并且可以改善其生存率,此时,AP小鼠脾脏中的DCs是显著升高的。因此,尼古丁可能通过诱导树突状细胞向调节性树突状细胞分化,从而改善急性胰腺炎的预后。