【摘 要】
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目的:以大叶千斤拔组培苗为材料,研究大叶千斤拔不同部位有效成分的抗氧化活性和药效成分的体外研究及不同植物激素对大叶千斤拔组培苗染料木素和染料木苷合成积累的影响,旨在探索大叶千斤拔有效成分的药效和提高大叶千斤拔组培苗染料木素和染料木苷的合成与积累的技术方法。方法:通过优化大叶千斤拔试管苗增殖方案,获得大量实验材料,使用不同生长素处理组培生根苗,测定生根过程中组培苗的生理生化、内源性激素含量和染料木素
【基金项目】
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广西创新驱动发展专项资金项目,项目名称:药用植物大数据中心建设,项目合同编号:桂科 AA18242040,项目起止时间:2018.10-2021.12; 国家重点研发计划项目,项目名称:中药核酸物质-成分-功能关联研究及其在活性成分合成途径研究中的示范应用,项目合同编号:2019YFC1711000,项目起止时间:2019.12-2021.12;
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目的:以大叶千斤拔组培苗为材料,研究大叶千斤拔不同部位有效成分的抗氧化活性和药效成分的体外研究及不同植物激素对大叶千斤拔组培苗染料木素和染料木苷合成积累的影响,旨在探索大叶千斤拔有效成分的药效和提高大叶千斤拔组培苗染料木素和染料木苷的合成与积累的技术方法。方法:通过优化大叶千斤拔试管苗增殖方案,获得大量实验材料,使用不同生长素处理组培生根苗,测定生根过程中组培苗的生理生化、内源性激素含量和染料木素与染料木甘含量,并通过相关性分析,阐明不同激素对大叶千斤拔生长发育及有效成分合成的作用。通过体外实验,阐明大叶千斤拔有效成分的抗氧化能力,以及对CNE1细胞增殖和迁移的效果。结果:大叶千斤拔根部化学成分的抗氧化活性是最高的,其次分别到全株、茎、叶;大叶千斤拔醇提物作用CNE1细胞24 h、48 h、72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为17.41μg/L、11.21μg/L、8.87μg/L;CNE1细胞空白组、0.5μg/L、1μg/L、2μg/L大叶千斤拔醇提物处理组细胞的相对迁移率分别为(22.73±0.56)%、(19.26±0.45)%、(14.83±0.49)%、(11.06±0.66)%,P<0.05。大叶千斤拔快速繁殖的最佳培养基配方为MS+6-BA1.0 mg/L+IAA0.3 mg/L+KT0.2 mg/L,其中6-BA对大叶千斤拔丛生芽增殖的效果最后,具有显著影响(P<0.05);对比不同部位不同生长时间的大叶千斤拔组培苗可知,染料木素、染料木苷主要分布于根中,第60天的组培苗染料木素含量最高,在第70天的检测样本中,检测到染料木苷的含量最高值。通过研究结果可知,在0.3(mol/L)ABT的处理下获得最高浓度的染料木素(4.59mg/g),1.0(mol/L)ABT的处理下获得最高含量的染料木苷(33.82mg/g)。不同激素对大叶千斤拔组培苗中SOD和POD含量的最大值均值出现在施加NAA的处理上,其中染料木素和染料木苷与POD成正相关,染料木素与SOD呈显著正相关(P<0.05),说明染料木素和染料木苷在植株体内的合成可能与抗氧化酶的活性有关。结论:通过本研究,明确了大叶千斤拔不同部位有效成分的抗氧化活性差异,探明了大叶千斤拔有效成分能够抑制CNE1细胞的增殖和迁移,优化了大叶千斤拔组培苗丛生芽增殖技术方案,阐明了IAA、NAA、ABT三种生长素对大叶千斤拔生长发育与有效成分的影响,获得了快速、高效积累大叶千斤拔染料木素与染料木甘的技术方案,为这两个有效成分的合成生产奠定了基础。
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