【摘 要】
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阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,AD)是一种渐进性神经功能退行性疾病,通常会在海马、皮质等组织出现选择性神经元丢失和变性、大量淀粉样斑块(SP)沉积以及神经原纤维缠结
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阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,AD)是一种渐进性神经功能退行性疾病,通常会在海马、皮质等组织出现选择性神经元丢失和变性、大量淀粉样斑块(SP)沉积以及神经原纤维缠结(NFTs),甚至导致神经死亡。由于发病机理复杂,目前还没有有效的预防及治疗措施,AD已成为老年人的健康和正常的生活的一大威胁。近年来研究发现,5-甲基胞嘧啶(5mC)会被TET蛋白家族氧化形成5-羟甲基胞嘧啶(5hmC),而5hmC作为DNA去甲基化的关键中间体对于维持机体的正常生理功能具有重要意义。已有一系列研究证实,DNA甲基化失调(5mC/5hmC)现象与一些疾病发生和发展关系密切,在AD等神经退行性疾病中,存在DNA甲基化失调现象。本研究选择了5种已被证实具有改善记忆、神经保护以及增强免疫等作用的天然化合物(虫草素、虫草酸、栀子苷、藏红花素以及麦角甾醇)以及目前研究较深入的天然化合物白藜芦醇为阳性对照进行细胞水平的研究,以发掘具有能调控5hmC水平以及改善AD神经元状态的天然化合物。通过Dot Blot实验发现,高浓度的虫草素、虫草酸、白藜芦醇和藏红花素均能显著的增加5hmC的表达水平;结合qPCR实验结果发现,虫草素能够提高TETs蛋白的表达量,并显著降低ApoE的表达量,暗示虫草素可能通过降低ApoE的表达来减少NFTs的形成和Aβ在大脑的沉积,从而对AD进程产生影响。同时免疫荧光染色结果显示,虫草素和虫草酸均能显著提高SHSY-5Y细胞的分化比例,且虫草素还能显著增长小鼠原代神经元的轴突长度以及树突分枝数。从筛选的结果来看,虫草素无论是对5hmC水平或是对神经元的形态都具有积极的影响,且大部分效果优于阳性对照白藜芦醇,说明虫草素可能对阿尔茨海默症等神经退行性疾病进程有一定的延缓作用,但具体作用机制还有待研究。本文研究结果为进一步讨论虫草素对AD的影响提供依据,同时也为相关疾病的病理研究提供新思路。
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