论文部分内容阅读
脂联素(ADP)是脂肪细胞分泌的一种脂肪细胞因子,由Scherer等于1995年首先从鼠的脂肪细胞分离出来,1999年Arita等将其命名为脂联素。因为脂联素是一种脂肪细胞因子,所以开始的研究集中于其对肥胖和糖尿病的作用方面。研究显示脂联素血浆浓度决定于腹部脂肪含量,脂联素可能是联系腹型肥胖、胰岛素抵抗及致动脉粥样硬化血脂谱中的内在因素。后来的研究发现脂联素水平与一些肿瘤具有相关性,临床流行病学研究资料发现,低脂联素水平是增加患大肠癌、乳腺癌、胃癌和前列腺癌的危险性的独立因素,同时脂联素受体的低表达也与大肠癌发生发展相关。我们运用免疫组化实验检验脂联素及脂联素受体在大肠癌组织中的表达情况,并应用MTT实验来验证脂联素对结肠癌HT-29细胞的增殖的影响,运用“划痕”法迁移实验验证脂联素对结肠癌HT-29细胞的迁移的影响,运用流式细胞学检测脂联素对结肠癌HT-29细胞周期的影响。目的：研究脂联素受体及脂联素在大肠癌组织中的表达情况及意义,人脂联素重组体对人结肠癌HT-29细胞体外增殖及迁移能力的影响。方法：1、应用免疫组织化学SABC法检测77例大肠癌组织中脂联素受体与脂联素的表达。2、将HT-29细胞分为对照组和脂联素重组体实验组(2.5,5,10,15μg/mL),用脂联素重组体作用一定时间后,分别以MTT法、细胞划痕法和流式细胞学实验检测脂联素重组体对大肠癌细胞增殖、迁移能力、细胞周期的影响。结果：免疫组化实验发现,大肠癌组织中脂联素受体及脂联素表达较正常大肠组织明显减少,AdipoR1、AdipoR2和ADP的表达都与浸润深度相关(P<0.05)；AdipoRl及ADP阳性表达率与浸润深度T分级呈显著负相关性(r=-0.237P=0.038, r=-0.469P=0.000)。AdipoR1、AdipoR2及ADP的表达与大肠癌有无淋巴转移相关(P<0.05)；且AdipoR1及ADP阳性表达率与淋巴转移呈负相关性(r=-0.237P=0.038, r=-0.231P=0.043). AdipoR1的表达与有无淋巴转移相关(P<0.05); AdipoR2及ADP的表达与大肠癌淋巴转移无明显相关性。通过MTT测定,发现脂联素重组体能显著降低HT-29细胞体外增殖和迁移能力(P<0.01),此作用具有浓度依赖性,从而进一步证明了脂联素可以抑制大肠癌细胞的恶性增殖；划痕试验证实,脂联素抑制大肠癌细胞的迁移,并且与浓度大小成正比,证明脂联素可以降低大肠癌细胞的运动能力,抑制肿瘤细胞迁移,从而抑制肿瘤细胞的转移；流式细胞仪检测结果表明脂联素重组体作用后G1期细胞比例增加,而S期细胞比例降低,各种浓度组与对照组比较差异均有显著性(P<0.01),且随着脂联素重组体作用浓度增加G1期细胞比例越高,而S期细胞比例越低,表明脂联素可以将大肠癌细胞分裂阻滞在G1期,抑制细胞分裂增殖。结论：脂联素受体及脂联素在大肠癌组织中的表达较正常大肠组织显著减少,两者的表达与大肠癌的浸润及转移呈明显负相关性,脂联素与脂联素受体的表达呈正相关；脂联素可抑制结肠癌细胞HT-29的体外增殖和迁移。