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2002-2003年暴发的SARS(Severe Acute Respiratory Syndrome)是由一类新型冠状病毒引起的高致死率的呼吸道疾病,在SARS冠状病毒溯源工作中,在蝙蝠体内发现一类与SARS冠状病毒在基因组上有很高相似性的冠状病毒,命名为SARS样冠状病毒(SL-CoV)。随后又在蝙蝠体内发现了多种冠状病毒的存在。本论文对蝙蝠冠状病毒S基因进行研究,内容如下:
1,构建了两株分别属于Alphacoronavirus属和Betacoronavirus属的蝙蝠冠状病毒672株和1292株的S蛋白全长真核表达克隆(pCDNA3.1-672S和pCDNA3.1-1292S)及两株蝙蝠冠状病毒RP3株和1292株截短真核表达克隆(pHCMV-RP3S1-his,pHCMV-1292S1-his,pET32a-1292S1),并以BJ01株SARS-CoV和RP3株SL-CoV为骨架构建了其与BM48-31株RBD区域的嵌合体S蛋白(pCDNA3.1-RP3-BM48S和pCDNA3.1-BJ01-BM48S)
2,选取了中华菊头蝠和中华鼠耳蝠两种蝙蝠制备蝙蝠原代细胞,成功制备了来源于肾、肺、心、脑、肠组织的原代细胞共九株,并将其中七株永生化,进行了三种蝙蝠冠状病毒S蛋白的假病毒感染实验,结果显示制备的蝙蝠细胞并不能被所用的假病毒感染。