TiM-3在先天性心脏病患儿外周血的表达及与肺动脉高压的相关机制的研究

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背景:  肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)是以肺血管阻力增高和右心室衰竭的发生为主要特征的一种病理生理过程,也是先心病患儿最为严重和棘手的并发症,在很大程度上影响着先心病患儿的治愈程度以及后期的生活质量。其发病机理到现在并未研究彻底。  近年来,T细胞免疫球蛋白粘蛋白域分子-3(T cell immunoglobulin-andmucin domain-containing molecules,Tim-3)在疾病中的作用日益受到人们的重视。Tim-3又称HAVcr-2(hepatitis A vires cell receptor2),选择性优先表达在分化的Th1细胞而不是Th2细胞上,通过与Tim-3配体(Tim-3 ligant,Tim-3L)即半乳糖凝集素-9(Galect in-9)结合,给T细胞提供一种负性共刺激信号,调节Th1及Th17细胞的反应,在免疫紊乱以及免疫耐受中起着重要作用。Th1特异的转录因子(T-box expressed in cells,T-bet)调控Tim-3的表达,通过激活T-bet/Tim-3/Galectin-9通路下调Th17的作用己成为调节疾病免疫紊乱的重要着眼点。研究认为:先心病肺动脉高压出现Th17/Treg失调,而作为Th1及Th17抑制性信号的调节分子Tim-3及Galectin-9和Th1特异性转录因子T-bet在肺动脉高压发病中发挥怎样的作用,到目前为止,国内外尚未见报道。  目的:  明确Tim3在先天性心脏病患儿外周血的表达。Th1有促炎症反应,Th2有促进肺动脉肌化的作用,而Tim3的表达对Th1和Th2的表达都有影响,通过Tim3的表达,研究对Th1与Th2表达情况的影响,研究对肺动脉高压的形成、加重之间的关系。  材料和方法:  本研究我们选取30例先天性心脏病患儿外周血,25例正常患儿外周血作为对照。抽取患儿外周血,4小时内进行实验,分离单个核淋巴细胞,分离后重新悬浮单个核细胞,进行细胞计数,计数完成后,取出小鼠同型对照抗体,CD3单染抗体,CD4单染抗体,人Tim3抗体进行染色,染色结束后,FCS软件进行流式结果分析。SPSS软件进行统计结果分析。  结果:  1正常对照组可见Tim3的表达。  2先天性心脏病患儿外周血可见Tim3的明显表达,高于正常对照组。  结论:  Tim3在先天性心脏病患儿外周血明显表达,一方面表明肺动脉高压确实存在免疫方面的紊乱问题。另一方面提示Tim3可能通过调节Th1与Th2的表达来参与先天性心脏病肺动脉高压的病变过程。
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