耐热蛋白是能在高温下保持其高级结构稳定性和其生物活性的一类蛋白质。为了解析这类蛋白稳定性,经常通过分子生物学、结构生物学、生物信息学等手段来开展相关研究,其主要目的则是利用耐热蛋白的稳定性特点对常用的蛋白酶进行改造,从而提高蛋白酶的稳定性,以满足人类的生产和生活需求。本文主要研究蚕蛹中耐热蛋白的分离纯化及其功能的初步探索。通过将正常的蚕蛹冻干粉加入ddH₂O充分匀浆之后,依次在50℃、60℃、70℃、80℃、90℃、100℃,每个温度水浴30min,离心取上清电泳检测,发现至少有3种蛋白能耐受80℃。质谱检测分析发现其中,一种为性别储存蛋白（SSP2）,一种为丝氨酸蛋白酶抑制剂（Serpin）。利用Serpin耐100℃高温的特性,并结合蛋白纯化手段,纯化得到Serpin蛋白。用Gelatin-PAGE法检测发现,100℃热处理后Serpin仍具有抑制胰蛋白酶的活性;而DSC扫描结果显示,Serpin在PBS（pH7.4）的条件下变性温度高达165.5℃。利用SSP2耐80℃高温的特性,并结合硫酸铵沉淀、SuperdexTM 200、Resource Q等蛋白纯化手段,纯化获得SSP2。利用非变性PAGE回收得到纯度85%以上的SSP2,并用SuperdexTM 200分子筛分离SSP2的多聚体和单体,SDS-PAGE检测结果表明该蛋白多聚体不是以链间二硫键形式存在。为了初步探索SSP2的功能,结合流式细胞检测技术和MTT法研究SSP2对细胞的作用,实验结果提示SSP2对BmN细胞有明显的抗凋亡作用。而家蚕中含有大量SSP2蛋白,其原因可能是SSP2对自身具有一定程度的保护作用,以此来调控家蚕正常的生长发育过程。另外,我们还对Hek293、U251细胞株进行了研究,结果显示SSP2对Hek293未见明显效果,却可抑制U251细胞株的生长。由此可见,SSP2具有一定程度的抑制癌细胞生长的作用。本课题为今后研究耐热蛋白的结构和功能奠定了基础,同时也为相关蛋白的功能研究提供了参考。