兔促减数分裂甾醇(MAS)合成酶CYP51及代谢酶△14-SR、C4MO的分子全长克隆及表达调控分析

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:Ericchn
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本文对兔促减数分裂甾醇(MAS)合成酶CYP51及代谢酶△14-SR、C4MO的分子全长克隆及表达调控进行了分析研究。文章利用RT-PCR和RACE克隆得到了兔子上述三种酶的全长cDNA;以NorthernBlot为主要研究手段,检测了MAS合成酶CYP51,代谢酶△14-SR、C4MO和甾醇转录调控因子SREBP在性腺发育中、卵泡生长过程中及激素作用后卵巢中的表达时空特异性;用二甲基磺酸乙烷(EDS)建立兔睾丸间质细胞破坏模型。本研究获得了兔CYP51、△14-SR和C4MO基因的cDNA全长,发现随兔有腔卵泡生长,FF-MAS合成酶CYP51mRNA表达增加,同时代谢酶△14-SRmRNA表达降低,推测这可能是导致卵巢中排卵前卵泡FF-MAS累积的原因。同时,促性腺激素FSH/LH对兔卵巢中CYP51、△14-SR和C4MOmRNA的表达调控不是通过SREBP1起作用。实验初步得到了小鼠抗兔CYP51多克隆抗血清。另外20mg/kg剂量EDS对兔间质细胞细胞毒作用微弱,不适合建立家兔睾丸间质细胞破坏模型。
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