目的：初次将六成汤应用于抗衰老的实验研究中,观察其对D-半乳糖致衰MRC-5细胞的活力、形态、抗氧化损伤、凋亡周期及凋亡相关蛋白表达的影响,为今后中医学延缓衰老提供新的依据。方法：制备六成汤含药血清,用80g/l的D-gal作用于人胚胎肺成纤维细胞(MRC-5细胞)制备衰老细胞模型。设立空白血清对照组,模型组,10%含药血清、8%含药血清、6%含药血清、4%含药血清、2%含药血清组(用空白血清稀释含药血清)等7组,通过MTT法确定最佳含药血清浓度及最佳作用时间。根据MTT结果,设立空白血清对照组,模型组,含药血清高剂量组(8%含药血清)、中剂量组(4%含药血清)、低剂量组(2%含药血清)等五组。各组细胞常规传代贴壁24h后按分组不同加入含药血清,置于(37℃,5%C02)孵箱中作用48h后光镜下拍照,并收集上清液及细胞,检测细胞内外MDA、NO含量；T-SOD、 GSH-Px活性；用流式细胞计数法检测细胞周期及细胞凋亡情况；用Western-blot方法检测衰老相关bax、bcl-2、caspase-3蛋白的表达情况。用SPSS13.0进行对实验数据进行统计分析,组间比较用方差分析,满足正态性和方差齐性。P<0.05为差异有显著性。结果：光镜下模型组细胞出现扁平、变大、融合变慢等衰老表现,其余各组细胞与模型组相比,细胞内外T-SOD、GSH-PX活性增强(P<0.05),细胞内NO和细胞外MDA降低(P<0.05),以中剂量组差异最明显；流式细胞计数法显示与模型组相比,各组G1期细胞减少,S期细胞增多,凋亡率降低；Western-blot法显示促凋亡蛋白caspase-3、bax表达减少,抑凋亡蛋白bcl-2表达增加,中剂量组变化最明显。结论：六成汤可能通过提高细胞内外氧化酶(T-SOD、GSH-Px)活性,加速NO的消亡及直接清除细胞外MDA发挥抗氧化活性,并减少衰老细胞G1期阻滞,调节细胞周期及凋亡相关蛋白的表达,减少细胞凋亡来发挥抗衰老作用。