论文部分内容阅读
研究背景及目的肺癌的病死率高居全球恶性肿瘤之首。其中非小细胞肺癌（non-small celllung cancer，NSCLC）占肺癌的80%左右，而非小细胞肺癌患者诊断时约70%为中晚期，已失去手术机会，只能进行化疗、放疗、手术治疗、支持治疗以及联合这些手段的综合治疗，而传统的化疗疗效似乎进入了平台期，其客观有效率约为30%，中位生存期8-9个月，1年生存率30%-40%。近年来表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors，EGFR-TKIs）的出现为肺癌患者带来了福音。然而EGFR-TKIs对肺癌患者有其较为苛刻的应用条件，即具有表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）基因有效突变患者，然而在西方人群中，肺腺癌EGFR基因突变的发生率只有10%左右，所以要想提高肺腺癌患者治疗的整体有效率，我们更应关注另外不具有EGFR基因有效突变的患者。体内外研究表明EGFR-TKIs亦可能对肿瘤组织过表达EGFR的患者有效。1α,25-二羟基维生素D3不仅在调控钙、磷代谢及维持骨稳定状态等方面发挥重要作用，而且对肿瘤的发生发展及预后均具有一定的作用。已有研究发现1α,25-二羟基维生素D3能抑制人肺腺癌A549细胞的生长。另一方面，国内外研究发现，1α,25-二羟基维生素D3对乳腺癌、成骨样细胞UMR106-01、卵巢癌及前列腺癌等细胞的EGFR基因的表达具有调控作用，但在肺癌中研究较少。基于此，本研究欲探讨1α,25-二羟基维生素D3与盐酸埃克替尼联合用药对A549细胞是否具有协同抗增殖作用及其可能的作用机制，为1α,25-二羟基维生素D3联合盐酸埃克替尼治疗肺癌的进一步研究提供实验基础。方法盐酸埃克替尼和1α,25-二羟基维生素D3单药及联合用药处理A549细胞后，用CCK-8法检测细胞增殖抑制率的变化；用western blotting法及RT-PCR法分别检测细胞EGFR总蛋白及EGFR mRNA表达的变化。结果与单药盐酸埃克替尼组和1α,25-二羟基维生素D3组相比，联合用药组具有更强的细胞增殖抑制作用（F值分别为248.45，1564.25，6590.17，P值均＜0.01）；联合用药组及1α,25-二羟基维生素D3单药组EGFR总蛋白及EGFR mRNA表达水平较阴性对照组及盐酸埃克替尼单药组有明显升高（P值均＜0.05）。结论1.盐酸埃克替尼与1α,25-二羟基维生素D3联合用药对人肺腺癌A549细胞具有协同抗增殖作用。2.1α,25-二羟基维生素D3能显著上调人肺腺癌A549细胞EGFR mRNA及EGFR总蛋白的表达。