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目的： 失血性休克是法医鉴定和临床上常见的休克类型之一，如不及时救治，可威胁生命，往往涉及治安、刑事案件。法医鉴定实践中，时有发现在临床救治失血性休克过程中，存在过度输液死亡的案例。因此，本课题拟建立兔失血性休克模型，探讨不同输液量救治的疗效及其重要器官组织的病变和代谢物变化，筛选具有鉴别价值的生物标志物及其组合，为失血性休克及其过度输液的死亡机理研究提供依据，为失血性休克的相关法医鉴定和临床救治提供科学依据。 方法： ⑴失血性休克模型：37只新西兰兔，1.5-2.5kg。随机分成3组：不输液组14只（A组）、常规输液组11只（B组）、过度输液组12只（C组）。观测血压、心电、呼吸等生理功能指标和机体反应情况，期间死亡者归为各自死亡组，存活的于5h时断颈处死。留取造模前、造模成功（放血至血压35-45mmhg）时、死后血液各5ml，离心取血清-80°冰箱保存。立即尸体解剖取脑、心、肺、肝、肾，观察大体形态，测量重量、体积，计算密度，各器官组织一半用于常规HE组织切片染色，一半用于代谢组学检测。⑵代谢组学分析：GC-MS检测氨基酸等代谢物谱，PCA、PLS-DA建模，观察代谢轮廓， NIST库代谢物定性，相对含量用t检验判断差异显著性。MedCalc软件绘制计算代谢物的受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC曲线）及其曲线下的面积（Area Under Curve，AUC）；MDR软件进行层次聚类分析，挑选聚类较高的回归分析，确定AUC得分高的标志物组合。 结果： ①成功建立兔失血性休克模型，A组、B组、C组死亡率分别为85.7％、0、83.3%，观察5h内的各组存活时间分别为68.92±7.30min、300±0.00min、171.42±4.09min，过度输液与不输液组死亡率无统计学意义，过度输液组存活时间显著高于不输液组。②血清差异性代谢物（P<0.05且VIP>1）：失血性休克与正常血清对照：丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、琥珀酸、丁二酸、嘌呤均显著升高，棕榈酸、亚油酸、反油酸均显著降低；B组与A组比较：氨基甲酸酯、异柠檬酸显著升高，丙氨酸、琥珀酸、延胡索酸、磷酸、脯氨酸、天门冬氨酸、丁二酸、次黄嘌呤、谷氨基酸均显著降低；C组与A组比较，乳酸、乙酸、丙氨酸、甘氨酸、缬氨酸、尿素、亮氨酸、丝氨酸、琥珀酸、延胡索酸、磷酸、脯氨酸、蛋氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、二羧酸、苯丙氨酸、丁二酸、半胱氨酸、次黄嘌呤、谷氨基酸、亚油酸、反油酸、硬脂酸、柠檬酸、酪氨酸、嘌呤、胆固醇均降低；氨基甲酸酯升高；C组与B组比较，甘氨酸、丙二酸盐、缬氨酸、尿素、异柠檬酸、蛋氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、亚油酸、反油酸、硬脂酸、柠檬酸盐、酪氨酸、胆固醇均降低，次黄嘌呤升高。③肝脏差异代谢物（P<0.05且VIP>0.75）：B组与A组比较，乳酸、磷酸、脯氨酸、谷氨酸、棕榈酸、亚油酸、硬脂酸、升高，尿素则相反；C组与B组比较，乳酸、尿素、磷酸、谷氨酸、棕榈酸、亚油酸、硬脂酸、甘氨酸降低。④差异代谢物的鉴别潜能：失血性休克早期与正常血清、常规输液与不输液、过度输液与不输液、常规输液与过度输液的血清鉴别价值高的代谢物组合分别为反油酸、琥珀酸、亮氨酸、苯丙氨酸，谷氨基酸、天门冬氨酸、丙氨酸，甘氨酸、亚油酸、柠檬酸，柠檬酸、亚油酸、异柠檬酸、苏氨酸、甘氨酸。失血性休克AUC0.914，特异性92.0%，灵敏度为89.3%，后三者AUC1，特异性100%，灵敏度为100%；常规输液与过度输液组肝组织中尿素鉴别价值高，AUC1，特异性100%，灵敏度为100%。 结论： ⑴建立了兔颈动脉放血、耳缘静脉输液失血性休克模型，成功率高、重复性好、操作性强。⑵血清中差异性代谢物组合，可指导法医实践中鉴别失血性休克、不同输液情况，同时可以指导临床救治失血性休克，肝组织中尿素可以单独作为鉴别指标。脑、心组织的代谢物轮廓差异性小，诊断价值不高。⑶常规输液量救治失血性休克可有效地调动机体代偿性代谢，实现显著的救治疗效。不输液组和过度输液组，代谢标记物和存活时间差异显著，提示两者存在明显不同的死亡机理。